本文主要从以下几个部分展开论述： 一、Linc00324在类风湿关节炎中的表达及意义 目的： 运用荧光定量PCR检测linc00324在风湿性关节炎患者中的表达水平，并分析其与临床相关指标的相关性，以期为风湿性关节炎的诊断和治疗提供新思路。 方法： 1.收集经临床确诊的类风湿关节炎患者外周血42例以及健康对照组的外周血27例。 2.分离外周血白细胞，提取总RNA，逆转录得到cDNA。 3.根据Genebank中的linc00324序列，设计特异性引物，以SYBR Green为染料，进行实时荧光定量PCR分析linc00324的相对表达水平。 4.用SPSS17.0分析linc00324与各临床指标的相关性，包括年龄、性别、白细胞计数、细胞类型与表型、用药、免疫球蛋白、补体、类风湿因子、红细胞沉降率、HLA-B27、抗环瓜氨酸多肽抗体、抗角蛋白抗体、C反应蛋白、抗核抗体等。 5.制作linc00324作为类风湿关节炎诊断指标和类风湿因子作为诊断指标的ROC曲线，比较两者作为诊断指标的差异性。 结果： 1.RNA质量分析:RNA浓度在30μg/ml以上，OD260/280在1.9～2.1之间。琼脂糖凝胶电泳显示RNA无明显降解。 2.将RNA逆转录，经荧光定量PCR扩增得到的溶解曲线仅有一个峰，说明扩增产物均一，并未产生非特异性扩增或引物二聚体，说明引物具有良好的特异性。 3.类风湿关节炎患者的外周血白细胞中linc00324表达量明显高于正常组(t=5.19，P=0.012)。 4.经治疗后的类风湿关节炎患者linc00324表达量较治疗前明显降低(t=6.46，P=0.00)。 5.Linc00324表达量与白细胞计数呈正相关(r=0.929，P=0.00)、与CD4细胞计数呈正相关(r=0.906，p=o.oo)、与CD4/CD8比值呈正相关(r=0.541，P=0.046)，但与CD8细胞计数无相关性。 6.Linc00324表达量与类风湿因子呈正相关(r=0.444，P=0.034)、与抗环瓜氨酸抗体量呈负相关(r=0.508，P=0.031)，但与年龄、性别、IgG、IgA、IgM、补体C3、补体C4、红细胞沉降率、HLA-B27、C反应蛋白、抗角蛋白抗体和抗核抗体ANA量无相关性。 7.Linc00324和类风湿因子的ROC曲线的线下面积分别为0.772和0.893，经z-检验，两者的诊断效果无显著性差异，P=0.064。 结论： linc00324在类风湿患者外周血白细胞中的表达量明显上调，有望作为类风湿关节炎诊断和疗效评估的辅助指标。 二、Linc00324在系统性红斑狼疮中的表达及意义 目的： 用荧光定量PCR检测linc00324在系统性红斑狼疮患者中的表达水平，并分析其与临床相关指标的相关性，以期为系统性红斑狼疮的诊断和治疗提供新思路。 方法： 1.收集经临床确诊的系统性红斑狼疮患者外周血56例，以及健康对照组外周血27例。 2.分离外周血白细胞，提取总RNA，逆转录得到cDNA。 3.根据Genebank中的linc00324序列，设计特异性引物，以SYBR Green为染料，进行实时荧光定量PCR分析linc00324的相对表达水平。 4.用SPSS17.0分析linc00324与各临床指标的相关性，包括年龄、性别、白细胞计数、细胞类型与表型、用药、免疫球蛋白、补体、类风湿因子、红细胞沉降率、C反应蛋白、抗dsDNA抗体、抗核抗体、抗角蛋白抗，体、抗环胍氨酸抗体等。　　5.制作以linc00324和抗dsDNA抗体分别作为系统性红斑狼疮诊断指标的ROC曲线，并比较两者作为诊断指标过程的差异性。 结果： 1.RNA质量分析: RNA浓度在30μg/ml以上，OD260/280在1.9～2.1之间。琼脂糖凝胶电泳显示RNA无明显降解。 2.将RNA逆转录，经荧光定量PCR扩增后得到的溶解曲线仅有一个峰，说明扩增产物均一，并未产生非特异性扩增或引物二聚体，引物特异性良好。 3.系统性红斑狼疮患者的外周血白细胞中linc00324表达量明显高于正常组(t=7.21，P=0.00)。 4.经治疗后的系统性红斑狼疮患者linc00324表达量较治疗前明显降低(t=6.51，P=0.00)。 5.Linc00324表达量与白细胞计数呈正相关(r=0.661，P=0.00)、与CD4细胞计数呈正相关(r=0.895，P=0.00)、与CD8细胞计数呈正相关(r=0.567，P=0.001)，但与CD4/CD8比值无相关性(P＞0.05)。 6.Linc00324表达量与抗dsDNA抗体量呈正相关(r=0.775，P=0.00)、与IgG量呈正相关(r=0.453，P=0.004)、与补体C3量呈正相关(r=0.392，P=0.001)、与抗环胍氨酸抗体量呈负相关（r=-0.565，P=0.035），但与年龄、性别、C反应蛋白、抗角蛋白抗体、红细胞沉降率、类风湿因子、抗核抗体ANA、IgA、IgM、补体C4量无相关性。 7.ROC曲线中，linc00324和抗dsDNA抗体作为系统性红斑狼疮诊断指曲线下面积分别为0.739和0.897，经z-检验，两者的诊断效果无显著性差异，P=0.854。 结论： linc00324在系统性红斑狼疮患者中的表达量明显上调，有望作为类风湿关节炎诊断和疗效评估的辅助指标。