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目的:腊梅花是我国传统的庭院名花和是民间传统用药,具有很多的药理功能,用于治疗感冒,解热镇痛,止咳化痰,降压。腊梅花的挥发油成分,具有较强的抗脂质过氧化的能力以及抑菌作用等生物学活性,但是腊梅花精油含量仅占总量的0.15%左右。工业化生产提取挥发油后,有大量的药渣被丢弃,造成资源浪费。据报道腊梅花中黄酮类成分具有抗氧化活性,若在提取挥发油的同时,能将黄酮类成分制成原料药,对其加以开发利用,将使腊梅花资源得到充分利用。本文对腊梅花总黄酮的提取、分离、纯化工艺进行研究,对腊梅花总黄酮进行单体成分分离,鉴定研究。同时还考察腊梅花总黄酮的抗氧化性。为进一步开发利用腊梅花这一特有的资源提供依据。方法:(1)腊梅花粉用水蒸气蒸馏法提取,挥发油另器保存,水提液,过滤,滤液70。C减压浓缩至药材质量与浓缩液体积为2:1(g:mL),加95%乙醇使含醇量达70%,醇沉静置48h。取上清液,减压浓缩至药材质量与浓缩液体积为1:1(g:mL)。(2)以芦丁标准品为对照品,采用紫外分光光度法测定腊梅花总黄酮的含量,并进行方法学考察。(3)通过考察不同类型大孔吸附树脂的静态吸附和解吸性能,确定大孔吸附树脂类型。(4)通过绘制静态吸附和动态解吸曲线,确定最佳纯化工艺条件。(5)用常压硅胶柱层析方法分离黄酮单体,用质谱、核磁共振、红外分光光度法对化合物进行结构鉴定。(6)利用Feton原理,进行体外抗氧化实验。结果:(1)将新鲜冷冻的腊梅花粉碎,加入3倍纯化水提取,提取4h,得到挥发油,水提液过滤,滤液70℃减压浓缩至药材质量与浓缩液体积为2:1(g:mL),浓缩液加入95%乙醇使含醇量为70%,醇沉48h。取出上清液,45℃减压浓缩,回收乙醇,浓缩液加纯水至药材质量与药液体积为1:1(g:mL)。(2)腊梅花总黄酮含量测定标准曲线:A=0.0272C-0.0016(A:吸光度,C:浓度:μ/mL)R2=0.9998,在0.9mg/L~19.90mg/L浓度范围内线性关系良好,仪器精密度RSD=1.0%.60min内稳定(RSD=0.88%),说明分析测定1h内完成,重复性RSD=0.1%(n=6),平均加样回收率100.43%(RSD=0.743%)。(3)腊梅花总黄酮的纯化工艺中,选择AB-8型大孔树脂,最优纯化工艺条件为:取稀释的腊梅花提取液(相对密度0.1),0.5BV树脂量药液,上样至AB-8型大孔吸附树脂,最佳流速为2.0mL/min,再用5BV树脂量70%乙醇洗脱,洗脱流速2.5mL/min,收集70%乙醇洗脱液。(4)腊梅花黄酮单体分离实验中,得到5个纯化合物,2个经过结构鉴定为:槲皮素(Ⅰ)和山萘酚(Ⅱ),另外3个正待鉴定。(5)腊梅花总黄酮抗氧化性实验中,清除50%羟基自由基(·OH)所需腊梅花药液浓度为:51.52μg/mL,具有一定的抗氧化性。结论:本文通过对腊梅花总黄酮提取、分离、纯化工艺进行研究,得到了最佳工艺条件。并首次分离出腊梅花中黄酮单体,得到5个化合物,鉴定出其中的2个黄酮单体化合物。通过腊梅花总黄酮的抗氧化试验,可知其具有抗氧化活性。