论文部分内容阅读
第一部分大鼠C6脑胶质瘤生长规律的动态MRI影像观察及病理对照研究目的:建立稳定、可靠的大鼠C6脑神经胶质瘤模型,并用临床MRI观察脑胶质瘤瘤体生长的变化规律,为进一步进行脑胶质瘤的在体实验研究提供基础。方法:首先体外培养大鼠C6胶质瘤细胞,然后收集处于对数生长期的C6胶质瘤细胞,经PBS洗涤后悬浮于含10g/L琼脂糖无血清培养基中,调节浓度使毎10μl含1×106个C6胶质瘤细胞,置于37oC水浴待接种。为建立稳定及可靠的大鼠C6神经胶质瘤模型,采用立体定向仪种植C6胶质瘤细胞,建立C6脑胶质瘤大鼠模型35只,分为4组。分别于第7天(n=5),第14天(n=5),第21天(n=5)行MRI扫描,最后1组自然死亡(n=20)用于生存分析。用1.5 T MRI作扫描成像,进行T1加权扫描(T1WI)、T2加权扫描(T2WI)和T1WI增强扫描,观察接种后第1、2、3周后肿瘤的MRI瘤体生长变化,并同大体病理结果进行比较。接种后行一般临床观察,并对接种大鼠处死后做主动脉多聚甲醛灌注固定,对脑组织和肿瘤标本进行切片观察和HE染色及GFAP免疫组化染色。结果:1.本研究应用立体定向尾状核接种C6胶质瘤细胞,所有接种大鼠均有胶质瘤生长(100%),免疫组化GFAP染色阳性,证实肿瘤是胶质细胞来源;肿瘤生长速度于第二周开始明显加快。2.正常大鼠脑组织MRI表现:T1WI相:呈稍低信号,皮质与白质分界不清,脑室及蛛网膜下腔亦不能分辨;T2WI相:脑皮质与脑白质能较好分辨,皮质信号高于白质信号,双侧侧脑室后角呈高信号;双侧小脑幕在T1WI及T2WI均能较好显示,呈对称性低信号;T1WI相增强扫描,脑组织未发现强化,但可见血管强化影。3.大鼠接种C6胶质瘤细胞后第一周末行T2WI、T1WI增强扫描即可显示有肿瘤瘤体生长和瘤周水肿的影像,两周后肿瘤瘤体呈快速增长,瘤体体积和大体病理结果相近。结论:1.本研究采用立体定向法向大鼠尾状核接种C6神经胶质瘤细胞制备大鼠神经胶质瘤模型的方法,接种率高达100%。2.临床1.5 T MRI T1WI增强扫描、T2WI可以较好的反映大鼠脑胶质瘤生长的变化,为脑胶质瘤的在体实验研究提供基础。C6脑胶质瘤体积生长规律为进一步胶质瘤伽玛刀治疗的实验研究提供基础。3.于第二周末至第三周末之间行相关医学处理是合适时机。第二部分伽玛刀治疗大鼠C6脑胶质瘤前后VEGF、AQP1、AQP4的表达变化及意义目的:通过对大鼠C6脑胶质瘤的伽玛刀治疗,检测伽玛刀治疗前后VEGF、AQP1、AQP4的变化,探讨伽玛刀治疗脑胶质瘤作用机制。方法:选取雄性SD大鼠50只,体重在350-500g之间。采用立体定向法对40只SD大鼠进行动物造模,分为肿瘤对照组和伽马刀治疗组,每组20只,余下10只为正常大鼠。伽玛刀治疗7d,对所有大鼠处死并应用免疫组化法检测VEGF、AQP1、AQP4并进行统计学分析。结果:1. VEGF在正常大鼠基本没有表达,在肿瘤对照组大鼠中表达增强。伽玛刀照射组VEGF的表达降低,表明伽玛刀治疗后肿瘤血管生长受到抑制,伽玛刀对胶质瘤确有疗效。2. AQP1在正常脑组织中几乎未见阳性表达,AQP4在正常大鼠脑组织中有表达。3.伽马射线照射后,VEGF、AQP1、AQP4均有不同程度降低。结论:伽玛射线可降低大鼠C6脑胶质瘤VEGF表达,可降低AQP1、AQP4的表达。