HBV感染对T细胞免疫功能影响的研究

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[目的]乙肝的发病机制十分复杂,目前认为宿主免疫系统功能紊乱是其病理损伤的主要机制或主要原因。其中大量证据表明,细胞免疫机制是HBV感染导致乙肝的主要发病机制。而T淋巴细胞是人体主要的免疫细胞,是免疫系统发挥功能的重要组成部分,其数量、功能异常及亚群比例失衡所导致的组织损伤与乙肝的发病密切相关。本研究旨在通过FCM检测乙肝患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+.CD4+.CD8+绝对细胞数及CD4+/CD8+比值的变化以探讨不同乙肝患者的免疫状态及临床意义以及与e抗原系统、HBV-DNA含量、YMDD变异、不同基因型之间的关系与临床意义。[方法]1.流式细胞仪:对228例不同乙肝患者的外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、 CD8+绝对细胞数及CD4+/CD8+比值进行检测,并将结果与正常对照组进行比较,以探讨各组之间的关系。2.电化学发光法:检测228例不同乙肝患者外周血中HBsAg.抗-HBs.HBeAg.抗-HBe、抗-HBc,将检测结果分为HBeAg(+)组与HBeAg(-)组。3.实时荧光定量PCR法:检测228例不同乙肝患者外周血HBV-DNA含量,将检测结果分为HBV-DNA(+)组与HBV-DNA(-)组。4.荧光PCR法:对HBV-DNA(+)组患者进行YMDD变异检测,将检测结果分为YMDD变异组(包括YVDD与YIDD变异)与YMDD野生组。5.荧光PCR法:检测CHB患者中HBV-DNA(+)患者的基因型(包括B和C型)。[结果]不同乙肝患者各组与正常对照组相比,结果如下:1.急性乙型肝炎(AHB)患者外周血T淋巴细胞亚群CD3+.CD4+. CD8+绝对细胞数明显增高;而慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)与原发性肝癌(PHC)患者依次降低,以LC.PHC两组降低最为显著;CD4+/CD8+比值AHB、CHB、LC、PHC四组有依次升高的趋势。2.HBeAg(+)和HBeAg(一)两组CD3+. CD4+.CD8+绝对细胞数均减少,CD4+/CD8+比值均高于对照组,且以HBeAg(+)组变化最为明显。3.HBV-DNA(+)和HBV-DNA(-)两组CD3+.CD4+.CD8+绝对细胞数均减少,CD4+/CD8+比值均高于对照组,且以HBV-DNA(+)组变化最为明显。4.HBV-DNA(+)患者中YMDD野生组、YVDD变异组、YIDD变异组CD3+、CD4+、 CD8+绝对细胞数均减少,CD4+/CD8+比值均高于对照组,且以两变异组变化最为明显。5.CHB患者中基因C型和B型两组CD3+.CD4+.CD8+绝对细胞数有减少的趋势,CD4+/CD8+比值均高于对照组,且以C型变化明显。[结论]研究结果表明不同乙肝患者体内存在T淋巴细胞亚群失衡及细胞免疫功能紊乱。1.AHB患者细胞免疫功能增强;LC和PHC患者则细胞免疫功能降低。2.HBeAg(+)乙肝患者细胞免疫功能低于HBeAg(-)乙肝患者。3.HBV-DNA(+)并且发生YMDD变异的乙肝患者细胞免疫功能显著降低。4.B型与C型CHB患者细胞免疫功能有降低的趋势,由以C型最为突出。
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