本研究以文心兰为试验材料,优化了文心兰的再生体系。试验结果表明：文心兰原球茎在激素配比为MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.3mg/L+2%(W/V)蔗糖+0.6%(W／V)琼脂的培养基上,经过25d后可增殖形成大量原球茎,30d左右继代1次,继代原球茎增殖倍数约为4。原球茎材料经培养累积到一定量时,将所得的原球茎切块接种到激素配比为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+5%(V/V)椰子水+2%(w／V)蔗糖+0.6%(W／V)琼脂的培养基上,有利于不定芽的分化。带丛生芽的组织块接种在1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+10%(V/V)椰子水+2%(W／V)蔗糖+0.6%(W／V)琼脂培养基上,15d后生根；25d后小苗基部可分化出长1cm左右的根,生根率达95%。通过基因枪法和农杆菌法分别转化进行文心兰的转基因研究。测定了原球茎对Hyg的抗性。以抗寒基因CBF3为目的基因,利用农杆菌介导遗传转化法,研究了预培养时间、侵染时间、共培养时间对农杆菌遗传转化率的影响试验。结果表明：原球茎对Hyg的敏感浓度为30mg/L、预培养1d、农杆菌侵染原球茎最适时间为15min、共培养时间为2d有利于转化率的提高。受体材料接种到MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+Carb 400mg/L培养基上进行脱菌培养,15-20d继代一次。2代后,转接到MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+5%(V/V)椰子水+Hyg 30mg/L培养基中进行抗性筛选。通过基因枪法进行转化,研究预培养时间对转化的影响,结果表明：最佳预培养时间为1d,最佳射程为6cm。延长培养10d后转入MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L+5%(V/V)椰子水+Hyg 30mg/L培养基上进行抗性筛选。对所获得的转化植株进行了PCR检测及Southern印迹杂交鉴定。选取抗性植株进行PCR检测,发现经农杆菌转化的有5株呈阳性,将其扩繁,进行PCR检测,初步确定只有3个株系能稳定遗传,再将这3个株系进行Southern检测,杂交信号呈阳性,说明目的基因CBF3已成功整合到文心兰的基因组中。通过基因枪转化的有2株呈阳性,将其扩繁,再进行PCR检测则呈阴性,说明通过基因枪的方法,目的基因CBF3没有整合到文心兰基因组中,其转化体系仍需优化。