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赶黄草（Penthorum chinense Pursh）为虎耳草科扯根菜属多年生草本植物,具有治疗黄疸、胆囊炎、水肿、肝损伤和传染性肝炎等作用。现代药理学研究发现,赶黄草具有抗癌、降血糖、保护肝脏、抑菌、抗炎、抗衰老等生物活性,主要得益于其丰富的黄酮类化合物。黄酮类化合物具有多种生物功能,如减肥、神经保护、抗癌等。此外,黄酮类化合物可以通过清除自由基、促进抗氧化酶或抑制氧化酶,发挥较强的抗氧化能力。因此,近年来,黄酮类化合物受到了越来越多的关注。本文以赶黄草地上部分为研究对象,对赶黄草总黄酮的提取工艺和纯化工艺进行优化,并通过体外、体内抗氧化试验系统评价其抗氧化能力,为赶黄草总黄酮的进一步开发与利用提供理论和技术支持。主要结果如下:1.采用乙醇浸提法提取赶黄草总黄酮。在单因素试验结果的基础上,通过响应面优化,得到最佳工艺为:液料比22∶1 mL/g、乙醇浓度68%、提取温度82℃、提取时间2.2 h。该条件下,其得率为10.72%,与预测得率的相对误差为0.32%。说明该工艺参数稳定可靠,具有应用价值。2.采用大孔树脂吸附法纯化赶黄草总黄酮。从7种不同类型的大孔树脂中筛选出DM130树脂为最适纯化树脂。优化得到其最佳纯化工艺为:上样液黄酮浓度1.0mg/mL、pH 5、上样速度1.0 mL/min、上样量110 mL,去离子清洗柱体,洗脱剂pH 8、70%乙醇、洗脱体积40 mL、洗脱速度1.0 mL/min。该工艺条件下,赶黄草总黄酮的回收率82.07%,纯度由20.04%提高至43.93%,提高了23.89%。说明DM130大孔树脂对赶黄草总黄酮的纯化效果较好。3.赶黄草总黄酮的体外抗氧化试验结果表明:纯化前、后赶黄草总黄酮均具有较好的体外抗氧化能力。纯化后总黄酮对DPPH、ABTS、羟基自由基清除能力的IC50分别比纯化前降低了0.117 mg/mL、0.203 mg/mL和0.394 mg/mL,最大清除率分别提高了3.83%、5.17%、17.39%,其中纯化后总黄酮对ABTS自由基的清除能力大于Vc。纯化后总黄酮的最大还原力和Fe2+螯合力比纯化前增加了0.121和16.34%,其中纯化后的最大还原力与Vc相当。说明纯化后赶黄草总黄酮的体外抗氧化能力显著增强。4.以秀丽线虫为模型生物,评价赶黄草总黄酮的体内抗氧化活性。结果表明:热应激处理14h时,空白对照组线虫全部死亡,纯化前、纯化后处理组线虫的存活率分别为9.33%、17.33%。与空白组相比,纯化前、纯化后处理组线虫的体内SOD酶活分别提高27.16%、47.09%,CAT酶活分别提高25.37%、77.80%,MDA含量分别降低35.28%、59.90%。说明纯化后赶黄草总黄酮的体内抗氧化能力显著提高。