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欧美杨108(Populus nigra×Populus deltoids"108")为美洲黑杨与欧洲黑杨的人工杂种无性系,为我国引进的杨树新品种。欧美杨108号生长速度快、适应性强、材质好,不仅是优良的林业木材,还是一个难得的优良速生树种。温度在植物生长发育中的作用极为重要,近年来我国由低温造成的灾害不断发生。因此,对耐低温品种的培育和现有物种的改良,对于农林业生产、环境保护及经济的发展具有非常重要的意义。本研究以欧美杨108为受体材料,以抗冻转录因子CBF3为目的基因,采用根癌农杆菌介导法进行转基因的研究。通过叶片的敏感性试验,确定叶片分化时卡那霉素的临界浓度为30mg/L,头孢噻肟钠的适宜浓度为600mg/L。对影响遗传转化效率的单因子变量进行筛选,优化了欧美杨108的遗传转化体系。欧美杨108叶片的遗传转化体系为:预培养时间2d,菌液浓度OD600=0.05-0.1,侵染时间3-5min,共培养时间3d;欧美杨108茎段的遗传转化体系为:预培养时间3d,菌液浓度OD600=0.1-0.2,侵染时间5-9min,共培养时间2d。利用叶盘介导法共侵染叶盘881个,获得抗性植株41株;利用茎段为外植体进行遗传转化,共侵染茎段743个,获得抗性植株104株。经PCR检测,叶片转化筛选出7株阳性植株,阳性率达17.1%;茎段转化筛选出5株阳性植株,阳性率达4.8%。通过RT-PCR进一步检测,7株转基因植株出现特异性条带,说明外源基因已经整合到欧美杨108基因组中并在转录水平得到表达。