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目的和意义： 推断死亡时间(PMI)一直是法科学与法医实践中重要的历史性难题。本实验在前实验基础上，利用多项技术检测肾脏组织生物力学和生物化学指标，结合形态学、量化病理学及生物、生化指标与PMI相关方程，综合分析，相互验证，组合地推断PMI。 材料与方法： 本地屠宰场放血处死的成年家猪，提取肾脏组织，保湿运输，置于恒温恒湿人工气候箱，每隔12h时间点在标准化拍照装置拍照并观察记录肾脏组织的大体形态学，规范―六定‖取材肾脏远离肾门部位肾皮质，分别常规4％甲醛和80%乙醇固定，制备标准化生物力学试件和固定-萃取液检材，常规制备肾组织石蜡切片并HE染色。利用Photoshop CS5软件测算肾大体照相同一部位RGB、R、G和B值；用Image-Pro Plus6.0显微量化分析HE染色组织，计算肾细胞核总面积、组织间隙总面积(Total area)、及其总IOD值、RGB值密度、面积与边界的比值等指标。利用便携式生物力学检测仪(KDI-0.2)行纵轴单向压缩检测甲醛和乙醇固定的肾组织试件，记录力-变形曲线、极限载荷、弹性模量、平均力、应变等数据。PH计测定甲醛和乙醇固定-萃取液 PH值；利用分光光度法检测固定-萃取液色度、吸光度以及茚三酮反应后吸光度值。 采用SPSS16.0、GraphPad Prism5统计软件和Excel2003对所得数据进行分析，取均数和标准差，采用t检验及方差分析，P<0.05为显著性差异和有统计学意义。 结果： ⑴家猪肾组织大体RGB取色以G、B值较佳，G、B值均于0h-84h上升，间隔12h组间比较p<0.05，与PMI回归方程分别为YG=0.5292X+78.5，R2=0.9113；YB=0.5088X+73.71，R2=0.9057。84h-144h变化趋势不明显。各组R值无统计学意义。 ⑵肾组织HE染色切片细胞核总面积及总IOD，0h-48h明显下降，间隔12h组间差异显著P<0.05。组织间隙总面积及 IOD，36h～216h逐渐增大，间隔24h组间差异显著P<0.05，相关回归方程：细胞核总面积Y=－10.347X+53.977，R2=0.9353；细胞核总IOD方程：Y=－11.485X+59.479，R2=0.9384；组织间隙总面积Y=20.663X+4.08，R2=0.9405；细胞间隙IOD方程：Y=50.448X+1.1829, R2=0.9343。 ⑶甲醛和乙醇固定的肾组织的生物力学检测，在―窗口期‖内极限载荷、弹性模量、平均力参数均呈下降趋势，与PMI有统计学意义P<0.05。甲醛固定的回归方程分别：―窗口期‖为12h-60h, Y=－0.46X+31.29，R2=0.8235；―窗口期‖为0h-60h,Y=－1.418X+90.17， R2=0.8175；―窗口期‖为0h-48h, Y=－0.1054X+6.669，R2=0.9167。乙醇固定的回归方程分别：―窗口期‖为48-108h, Y=－0.5260 X+69.87，R2=0.8923；―窗口期‖为48-120h，Y=－3.446X+442，R2=0.8310；―窗口期‖为48-96h，Y=－0.1630X+19.91，R2=0.6695。 ⑷甲醛和乙醇的固定-萃取液检测，PH值随PMI时序性变化不明显，无统计学意义。乙醇固定-萃取液350nm色度值的窗口期12-72h，与PMI相关回归方程Y=0.001X+0.064， R2=0.8180；茚三酮显色570nm吸光度的窗口期24h-96h，与PMI相关回归方程 Y=－0.0126X2+0.2881X-0.4932，R2=0.8661；甲醛固定-萃取液茚三酮显色570nm处吸光度的窗口期12-60h，与PMI相关回归方程Y=0.011X+0.229，R2=0.7850。 结论： ⑴肾脏组织固定-萃取液的生物化学、组织形态学、生物力学等多项量化指标，随PMI呈时序性改变，本质上均是死后组织自溶腐败的生物大分子降解过程，其物质生物化学变化决定了组织形态结构变化，形态结构变化又决定了生物力学性状变化，符合本-构关系和构-效关系的基本原理。 ⑵常规甲醛和乙醇固定肾组织的生物力学性状推断PMI，甲醛固定的优于乙醇。 ⑶肾组织的常规甲醛和乙醇固定-萃取液中，茚三酮显色的蛋白质及其降解产物等混合物的相关生物化学检测指标及其稳定性，乙醇的均优于甲醛。