黄绿蜜环菌凝集素的分离纯化、理化性质及其抗肿瘤活性的研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:inKin9
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄绿蜜环菌(Armillaria luteo-virens)是一种具有抗氧化及抗肿瘤活性的珍稀野生食用菌,为进一步研究其药用价值,以黄绿蜜环菌干子实体为材料,通过硫酸铵沉淀、DEAE-cellulose阴离子交换柱层析、CM-cellulose阳离子交换柱层析、Q-Sepharose阴离子交换柱层析和FPLC Superdex75凝胶过滤柱层析的方法,从黄绿蜜环菌干子实体中分离得到两个新的分子量相近的凝集素ALA(分子量为29.1 kD)和ALB(分子量为29.4 kD),ALA由两个不同亚基组成,其亚基分子量分别为15.0kD和14.1kD,ALB由两个相同的亚基组成,每个亚基的分子量均为14.7kD。 ALA和ALB的凝集活性能特异性地被菊糖所抑制,在12.5mmol/L以下的HCl,25mmol/L的NaOH和70℃以下的温度条件下凝集活性稳定。ALA和ALB的凝集活性受Fe<3+>、Al<3+>的强烈抑制,而不受Ca<2+>、Mn<2+>和Mg<2+>的影响。 黄绿蜜环菌凝集素ALA和ALB分别在一定程度上能够延长腹腔荷瘤(Sarcoma180)小鼠的生存期,减缓小鼠体重的增长速度,对实体瘤的增长有较强的抑制作用,在1μmol/L时表现出最大的促脾细胞有丝分裂活性,对肿瘤细胞如淋巴细胞白血病细胞株L1210、宫颈癌细胞株Hela、淋巴瘤细胞株MBL2表现出很强的细胞毒性,但对肝癌细胞株HepG2没有表现出细胞毒性。 采用悬滴蒸发法得到了ALA和ALB两个凝集素的晶体,利用3’RACE的方法克隆到了凝集素ALB的cDNA部分片断,大小为376bp,经蛋白比对表明,3’RACE产物蛋白的部分氨基酸序列和斑马鱼(Danio rerio)中预测的与丝氨素/脯氨酸激酶11相互作用蛋白的部分氨基酸序列的相似性为43%,和牛泰勒虫(Theileria parva)假设蛋白的部分氨基酸序列的相似性为35%。
其他文献
马铃薯是世界第四大粮食作物,在我国粮食、蔬菜、饲料和加工原料生产上占有重要地位。病毒病一直是马铃薯生产发展的一大障碍,其不仅影响了马铃薯品种退化、产量下降更重要的是影响了马铃薯的品质。传统的育种方式已经不能满足马铃薯生产的需要,所以利用基因工程技术结合传统的育种技术进行马铃薯新品种的培育是当前马铃薯生产最需解决的问题。本研究目的在于利用番茄与马铃薯高同源性特点培育多抗,耐储藏马铃薯品种做前期的理论
目的 回顾性验证超声量化评分系统对行子宫动脉栓塞化疗(UACE)联合清宫术治疗的剖宫产瘢痕妊娠患者病情、预后的预测效能.方法 收集剖宫产瘢痕妊娠并接受UACE联合清宫术治疗
学位