不同材质及形态的纤维素类可吸收止血材料的止血性能评价

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目的:通过体外凝血实验及大鼠脑损伤止血实验,来观察不同材质及形态的纤维素类可吸收止血材料的止血性能差异,为临床使用提供参考。方法:1.体外凝血实验取纱布形态的纤维素类可吸收止血材料,根据材质不同分为四组:(1)羧甲基氧化再生纤维素组,全血+羧甲基氧化再生纤维素止血纱布;(2)羟乙基纤维素组,全血+羟乙基纤维素止血纱布;(3)羧基氧化再生纤维素组,全血+羧基氧化再生纤维素止血纱布;(4)对照组,全血+普通纱布,每组使用8只SD大鼠。大鼠使用10%水合氯醛腹腔麻醉(0.4ml/100g),颈外静脉取全血,将各止血材料及纱布裁剪成约1cm×1cm大小的正方形,置入50ml试管内,取200u L的血样缓慢滴在试管内每个材料上,加入20ul的0.2mmol/l Ca Cl2溶液,放入37℃恒温箱内保持3min。将25 ml去离子水在不破坏血凝块的情况下加到每个试管中,再从试管中取上清液7.5ml,放入15 ml离心管中,在3600r/min里离心5min,取上清液1ml置入1.5ml EP管内再于3600r/min离心5min,37℃孵育1h后,等分为200ul加入96孔板,通过测量它们540 nm处的OD值来比较各溶液的血红蛋白水平。在此基础上,取不同形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料分为:(1)纱布组,全血+纱布形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料;(2)纤丝组,全血+纤丝形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料;(3)非织布组,全血+非织布形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料;(4)对照组,全血+普通纱布,重复上述实验。测量各组溶液540 nm处的OD值来比较它们的血红蛋白水平。2.大鼠脑损伤止血实验依据体外凝血实验结果并结合临床实际使用情况,将止血材料按材质分为三组:(1)羟乙基纤维素组,使用羟乙基纤维素止血纱布止血;(2)羧基氧化再生纤维素组,使用羧基氧化再生纤维素止血纱布止血;(3)对照组,不使用可吸收止血材料止血,每组取SD大鼠5只。将各止血材料裁剪成约5mm×5mm大小,实验前将止血材料与棉片称重。大鼠以10%水合氯醛腹腔麻醉(0.4ml/100g),麻醉成功后将其固定于操作台上,纵行切开颅顶皮肤,在右侧顶骨距矢状缝、冠状缝各5mm处用磨钻仔细打磨出一约8mm×5mm的骨窗,保持硬膜的完整不受损、不伤及矢状窦。使用棉球处理骨窗及周围软组织出血,并使用干洁棉球保护骨窗周围,应用外科手术刀在骨窗中心,与矢状缝平行,纵向划出一约长5mm、深3mm伤口。将止血材料迅速放置于伤口上(对照组直接使用棉片),后敷上棉片,使用2g砝码按压,观察棉片吸收血液情况,每10s更换干洁棉片,待棉片未再吸收血液、伤口无新鲜出血后,撤去棉片观察1分钟,无新发出血视为止血成功,记录止血所用时间T,撤去伤口表面止血材料,收集止血材料及所用棉片,根据术前称重计算使用前总质量W0。将收集的止血用的材料及棉片于37℃恒温烘干1h,干燥后称重记为W1,W(质量差)=W1-W0,W可以代表大鼠的出血量,比较各组的W与T来评价止血材料的止血效果。在此基础上,选取不同形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料重复上述实验,分组为:(1)纱布组,使用纱布形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料止血;(2)纤丝组,使用纤丝形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料止血;(3)对照组,不使用可吸收止血材料止血,每组取SD大鼠5只。比较各组间止血所用时间T与实验前后质量差W。3.统计本次统计分析采用SPSS23.0统计软件进行数据处理。数据以均值±标准差表示,采用F检验进行比较,P值<0.05为有统计学意义。结果:1.体外凝血实验1.1不同材质的纱布类止血材料的OD值:实验组:羧甲基氧化再生纤维素组:0.1926±0.0745、羟乙基纤维素组:0.2424±0.0955、羧基氧化再生纤维素组:0.1756±0.0491。对照组:0.4275±0.0292。各组间的OD值不全相同,对照组的OD值均高于各实验组,有统计学意义(P<0.05),并对实验组进行两两比较,各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。1.2不同形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料的OD值实验组:纱布组:0.1756±0.0491、纤丝组:0.0019±0.0009、非织布组:0.0235±0.0234。对照组:0.4275±0.0292。各组间的OD值不全相同,对照组的OD值均高于各实验组,有统计学意义(P<0.05),并对实验组进行两两比较,其中纱布组与纤丝组、纱布组与非织布组的差异均有有统计学意义(P<0.05),而纤丝组与非织布组间差异无统计学意义(P>0.05)。2.大鼠脑损伤止血实验2.1.1不同材质的纱布类止血材料的止血时间T(s):实验组:羟乙基纤维素组:134.00±27.02、羧基氧化再生纤维素组:114.00±11.40。对照组:182.00±20.49。2.1.2不同材质的纱布类止血材料的及棉片实验前后质量差W(g):实验组:羟乙基纤维素组:0.0049±0.0016、羧基氧化再生纤维素组:0.0074±0.0013。对照组:0.0101±0.0014。各组的T与W不全相同,其中对照组的T与W均大于各实验组差异有统计学意义(P<0.05),而实验组各组间的T与W的差异无统计学意义(P>0.05)。2.2.1不同形态的羧基氧化再生纤维素类的止血时间T(s):实验组:纱布组:114.00±11.40、纤丝组:74.00±11.40对照组:182.00±20.492.2.2不同形态的羧基氧化再生纤维素类的及棉片实验前后质量差W(g)实验组:纱布组:0.0074±0.0013、纤丝组:0.0041±0.0005。对照组:0.0101±0.0014。各组的T与W不相同,其中对照组的T与W均大于各实验组差异有统计学意义(P<0.05),实验组中纱布组的T与W均大于纤丝组,有统计学意义(P<0.05)。结论:1.相较于不使用可吸收止血材料,使用纤维素类可吸收止血材料可以促进血液凝固、加速活动性出血的止血。2.不同材质纱布形态下的纤维素类止血材料在促进血液凝固及处理活动性出血时的表现无明显差异。3.纤丝形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料在促进血液凝固和处理活动性出血时的表现优于纱布形态的羧基氧化再生纤维素类止血材料。
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