在过去的几十年里,多肽在医药和生物技术领域得到了广泛的应用,同时治疗类多肽的研究也得到了复兴,多肽类药物本身具有较大的安全性、较好的相容性和较高的疗效。目前有超过八十种多肽类药物通过美国食品药品管理局(FDA)的批准上市,并且数目在不断增加,有超过一百四十种多肽类药物处于临床研究,五百多种治疗类多肽处于临床前研究。多肽药物主要用于新陈代谢类疾病和肿瘤类疾病,在未来的治疗领域有着在巨大的潜力。但是,当多肽药物的作用靶点在细胞内时,多肽分子本身的分子量较大,不可能通过被动扩散进入细胞膜,需要借助细胞内输送载体的作用才能帮助其进入细胞内发挥药效。本课题研究的多肽A1拟采用静脉注射给药,而多肽类药物在血液循环中本身易被降解,很难到达靶器官,需要采用制剂手段保护其在血中不被降解,顺利到达靶器官发挥药效。基于这些考虑,本课题提出对多肽分子A1进行化学修饰,并制成脂质体制剂,一方面保护修饰的A1功能肽在血液循环中不被降解,另一方面将多肽输送入细胞内发挥药效。本研究设计了三种不同修饰的A1系列多肽,包括硬脂酸(stearic acid)修饰A1肽(A1-SA),硬脂酸修饰的穿膜肽CPP融合的A1肽(A1-CPP-SA),以及硬脂酸修饰的、金属蛋白酶MMP底物融合的CPP以及A1肽(A1-CPP-MMP-SA),并对其进行制剂处方工艺研究,获得了6个多肽脂质体制剂优选处方,然后通过两个细胞株的细胞增殖试验评估其药效,并结合工艺,载药量等因素,选择了A1-SA脂质体制剂为候选制剂,选择A1-CPP-SA脂质体为备选制剂。对脂质体进行理化性质的表征,包括粒径,粒径分布系数,电位,微观形貌,以及多肽的载药量,药效等等,并针对其与细胞作用进行细胞内输送的过程进行了考察。动物实验显示,候选制剂A1-SA脂质体和备选制剂A1-CPP-SA脂质体的体内应用的安全性明显优于A1,单次和连续三次给药小鼠急毒实验显示,A1-SA脂质体最大耐受剂量(MTD)<3 mg/kg,无毒性反应剂量(NOAEL)<1 mg/kg;A1-CPP-SA脂质体MTD为3 mg/kg,NOAEL<1 mg/kg。此外,候选制剂A1-SA脂质体的静脉注射后稳定性也有所提高,单次给药后,A1-SA脂质体在小鼠血浆和肝脏中的半衰期分别为5.02 h和2.08 h;AUC分别为20492和7181。