双水相萃取在提取分离中草药生物碱中的应用

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中草药是中华民族传统文化的瑰宝,在人们的疾病预防及康复等方面有着非常重要的作用。中草药由于副作用少、疗效确切,对各种疑难杂症具有西药不可比拟的作用,越来越受到人们的关注。在现代化中药的生产中,分离富集是非常重要的步骤。然而,传统的分离富集方法如水提法、回流提取等,不仅费时费力,而且得到的粗品纯度又不高,其他分离方法如有机溶剂萃取、沉淀分离等要用到大量有机溶剂,污染环境。   本文建立了绿色环保的分离/富集体系—高聚物双水相体系及表面活性剂双水相体系分离富集黄柏粗提液中盐酸小檗碱,探讨了盐的种类、盐浓度、高聚物浓度及表面活性剂浓度、料液比等对双水相的形成以及萃取率的影响;将回流提取与双水相萃取分离相结合,用于提取分离黄柏中的盐酸小檗碱以及防己中的粉防己碱,该方法操作简单、廉价易得且绿色环保,得到的粗品纯度较高,为中草药中的有效成分的提取分离/富集提供了新的方法,具有广阔的发展前景。   本文主要研究内容和结论如下:   (1)采用PEG400/(NH4)2SO4双水相体系萃取黄柏粗提液中的盐酸小檗碱,优化出的最佳萃取条件为:PEG400质量分数为15%,(NH4)2SO4浓度为45%,pH值为9和水浴温度为70℃,水浴时间为30min,黄柏粗提液加入量为6.Oml,萃取条件下的萃取率为99.52%,所用高聚物用量小、相比小、分配系数大、分离效果好。   (2)采用TritonX-100/Na2SO4双水相分离富集黄柏粗提液中的盐酸小檗碱,优化出的最佳分离纯化条件为:TritonX-100质量分数为24%、Na2SO4浓度为12%、pH值为9,黄柏粗提液加入量为5.Oml,此条件下的萃取率为97.94%;盐酸小檗碱的反萃条件为:加水量为8倍量,反萃次数为2次,pH值为4,水浴温度为75℃,水浴时间为30min,总得率为46.03mg/g,粗品纯度为9.52%,解决了传统高聚物双水相中高聚物难以回收的问题。   (3)采用回流提取辅助乙醇双水相提取分离黄柏中的盐酸小檗碱,优化出的最佳提取分离条件为:黄柏粉末加入量为40g即料液比为1∶10,乙醇的质量分数为24%,(NH4)2SO4的浓度为40%,双水相pH值为6,回流提取2h,平均萃取率为98%,得率62.69mg/g,纯度为7.24%,回流提取辅助双水相提取分离体系为中药中有效成分的一步提取分离提供了一种新的方法。   (4)采用回流提取辅助乙醇双水相提取分离防己中粉防己碱,优化出的最佳提取分离条件为:防己粉末加入量为40g即料液比为1∶8,乙醇的质量分数为20%,(NH4)2SO4的浓度为35%,双水相pH值为9,回流提取2h,平均萃取率为84.50%,得率为19.80mg/g,纯度为20.30%,得到的粗提物纯度较高,此提取分离体系为中药中有效成分的一步提取分离提供了一种新的思路。
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