淋巴化疗技术利用淋巴系统具有吞噬微粒的特点,将小分子的抗癌药物与微粒结合后进行局部注射以达到对淋巴转移灶靶向给药的目的,同时明显降低了血中药物浓度和全身毒副作用。蚕丝蛋白作为一种天然蛋白质,不仅有突出的综合力学性能,而且还具有良好的生物相容性、生物可降解性并且无免疫原性,加之来源充足、价格适中等诸多优点,目前已被广泛地应用于生物医药领域。本论文采用丝蛋白纳米微球来负载传统抗癌药物氟尿苷(FUDR)和5-氟尿嘧啶(5-Fu),探讨了载药微球多方面的性能,以期将其应用于淋巴化疗中。利用丝蛋白独特的亲疏水多嵌段共聚物结构特征和构象转变机制,在乙醇诱导和冷冻协同作用下,成功地制备了结构规整、分散性好且稳定的负载氟尿苷的丝蛋白纳米微球,整个工艺过程简单且制备过程中无需引入任何有毒试剂。我们发现,在载药微球表面通过静电作用吸附一层聚乙二醇分子后能有效提高微球的再分散能力及其储存稳定性。通过改变丝蛋白初始浓度和投药量可以调节微球尺寸(210-510nm)和载药量。载药微球的缓释性能随丝蛋白浓度的增大而得以提高,但投药量对其基本没有影响。当初始丝蛋白浓度为40 mg/mL时,微球的最大载药量为6.8%,对应的缓释时间约为2天。通过体外细胞培养实验表明,即使在丝蛋白微球浓度较高(如1.0 mg/mL)时,无论正常细胞293T还是Hela细胞的存活率都超过80%,表明由此自组装方法制备得到的丝蛋白微球具有良好的生物相容性。通过观察标记有异硫氰酸荧光素的丝蛋白微球与Hela细胞共培养体系可知,丝蛋白微球能粘附于癌细胞表面或进入其内部。进一步考察载药丝蛋白微球与Hela细胞共培养体系后发现,载药微球能明显抑制Hela细胞的增殖。临床上之所以用氟尿苷来部分替代5-氟尿嘧啶来进行传统的全身化疗,是考虑到后者对正常细胞的毒性太大,但是如果能用载体负载药物的形式来解决5-氟尿嘧啶毒副作用太大的问题,可以避免药物进入体内后再由衍生物到5-氟尿嘧啶转化的复杂步骤,使药效发挥得更直接有效。出于更好地利用这种传统而廉价的抗癌药物的目的,我们同样采用丝蛋白自组装及微球表面聚乙二醇化的方法,制备了负载有5-氟尿嘧啶的丝蛋白纳米微球。通过调节丝蛋白浓度和投药量可得到大小为290-460 nm的载药微球。该体系的最大载药量超过8%,缓释时间超过2天。负载有5-氟尿嘧啶的丝蛋白微球与负载氟脲苷的微球一样能够有效地杀死Hela细胞。以上这些研究结果均表明两种载药丝蛋白纳米微球由于具有合适的粒径以及有效地杀灭癌细胞的能力,因此作为淋巴化疗药物具有较好的临床应用潜能。