【摘 要】
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细胞膜是由脂筏和多种蛋白质组成的复杂结构,它是能够与细胞骨架和外界环境紧密相连的特殊存在。研究细胞膜蛋白的分布特征对我们研究细胞膜结构与功能起到了至关重要的作用
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细胞膜是由脂筏和多种蛋白质组成的复杂结构,它是能够与细胞骨架和外界环境紧密相连的特殊存在。研究细胞膜蛋白的分布特征对我们研究细胞膜结构与功能起到了至关重要的作用。而生物成像作为最简单最直观的方法被我们广泛的应用于对细胞的研究当中。随着荧光显微镜的发展,其中单分子定位的超分辨成像为解决这些问题提供了新的信息,并有希望为揭示细胞膜的许多特征提供新途径。并且选取合适优秀的标记方法对成像则起到了至关重要的作用。1.以芳基硫代乙酸酯和氯(杂)芳烃为原料,建立了一种简单、有效的钯催化碳硫键的合成方法。该方法可应用于多种底物,并获得高达95%产率的理想芳基硫化物。2.根据课题组对细胞膜转体蛋白的研究,以每步60%以上的产率开发了一种用于研究色氨酸转体蛋白的色氨酸荧光探针;同时也以每步65%以上的产率合成了一种用于研究细胞膜上H~+/K~+ATP酶蛋白的奥美拉唑荧光探针。3.利用dSTORM单分子成像技术,使用合成的吉非替尼荧光探针标记A549活细胞膜上的EGFR蛋白,由于吉非替尼荧光探针分子是小尺寸结构,所以可以进入到分子与分子之间的所有空隙,进而更好的识别和标记靶表位。利用吉非替尼荧光探针标记的EGFR蛋白,细胞每平方微米的平均定位点数是739±73,平均簇面积为0.246μm~2,簇内平均点数为3.33±0.51。与常用的西妥昔单抗和EGF配体探针相比,该探针获得了更高质量的dSTORM超分辨图像。
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