PCV2b病毒样颗粒疫苗的制备及检测

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为了研制病毒样颗粒(VLP)疫苗,我们以猪圆环病毒衣壳蛋白(PCV2b-CP)为模型搭建VLP疫苗制备和检测的技术平台。采用PCR搭接方法获得密码子优化的PCV2b-CP编码基因,并以PET28a为表达载体尝试在大肠杆菌内可溶性表达PCV2b-CP。采用多种方法对PCV2b-CP的纯化及组装进行摸索同时使用透射电子显微镜(TEM)和荧光光谱分析(FSA)两种方法对VLPs的组装状态进行检测,并对形成的VLPs的抗原性及免疫学活性进行了研究。结果显示:经大肠杆菌表达的可溶性PCV2b-CP可形成与天然病毒相似的VLPs且组装液成分影响VLPs的组装状态;PCV2b VLP能够有效诱导小鼠产生PCV2b特异性抗体,具有开发成PCV2b疫苗的潜能;FSA检测不同组装状态的VLPs发现:组装的PCV2b VLPs的发射光谱显示为在320nm处有最高值的非典型曲线,虽FSA不能取代TEM,但其可作为初步检测是否形成VLP的一种简便而快速的技术手段。
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