【摘 要】
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背景:在2016年全球十大死亡病因中,缺血性心脏病和脑卒中位于前两位,严重威胁人类健康。动脉粥样硬化与血栓形成是心血管疾病的的主要病理事件,也是疾病防治的重要靶点过程。研究人员已构建多种心血管疾病动物模型,其中,脊椎动物斑马鱼繁殖能力强、体积小、且与哺乳动物高度保守,实验开展具有极高的经济性,非常适合进行心血管疾病相关药物筛选。实验材料与方法:针对动脉粥样硬化和血栓形成这两大心血管疾病病理过程,本
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背景:在2016年全球十大死亡病因中,缺血性心脏病和脑卒中位于前两位,严重威胁人类健康。动脉粥样硬化与血栓形成是心血管疾病的的主要病理事件,也是疾病防治的重要靶点过程。研究人员已构建多种心血管疾病动物模型,其中,脊椎动物斑马鱼繁殖能力强、体积小、且与哺乳动物高度保守,实验开展具有极高的经济性,非常适合进行心血管疾病相关药物筛选。实验材料与方法:针对动脉粥样硬化和血栓形成这两大心血管疾病病理过程,本课题分别使用高脂高胆固醇喂养和苯肼刺激构建了斑马鱼高血脂模型和血管损伤模型。结合多种转基因斑马鱼品系,如特异性标记红细胞珠蛋白的鱼系Tg（LCR:eGFP）、标记血小板的鱼系Tg（CD41:eGFP）以及标记肝脏细胞的鱼系Tg（Apo14:eGFP）等,进行基于表型的高效药物筛选。主要的实验方法有斑马鱼活体显微镜观察、O-dianisidine血红蛋白染色、油红O中性脂肪染色、荧光定量PCR、高内涵成像、流式分析、显微注射等。结论:基于转基因斑马鱼模型,本课题对两个基于传统中药配方的活血化瘀类中药成药——冠心宁片与通脉口服液的药效作用和机制展开研究。实验结果提示:在高脂高胆固醇喂养的斑马鱼动脉粥样硬化模型中,冠心宁片可显著降低斑马鱼体内脂质水平。通过药材及化合物筛选,进一步发现其中原儿茶醛和洋川芎内酯Ⅰ具有降脂活性,可能分别通过下调胆固醇内源性合成通路中的羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶a与羟甲基戊二酸单酰辅酶A合成酶1的表达来降低胆固醇水平。在苯肼诱导的斑马鱼血管损伤血栓模型中,发现通脉口服液可显著增加心脏回心血流量,降低外周体循环中血红细胞堆积表型,并恢复血小板循环。药效物质筛选提示隐丹参酮为通脉中抗血栓作用的主要活性化合物,其可能机制包括降低体内氧化应激与脂质过氧化水平,及抑制凝血级联反应中关键因子的转录表达。综上,本研究为两种心血管疾病经典临床用中成药提供了基于动物模型的体内支持性数据,揭示了其中起关键药效成分的活性化合物,为心血管疾病的预防与治疗提示了新的药物靶标。
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