论文部分内容阅读
研究背景 肾母细胞瘤是小儿常见的腹膜后恶性肿瘤，最常发生于2～5岁儿童，发病率占儿童恶性肿瘤的6％，多首先因腹部肿块、血尿而发现，部分患儿可有高血压，偶有低热和腹痛。B超、CT及静脉尿路造影为其主要的诊断手段，尽管近年来研究发现有多个基因突变参与了肾母细胞瘤的早期分子事件，但临床上尚无特异性的肿瘤诊断及预后分子标记物发现。 细胞周期是细胞生命活动的基本过程，在这个过程中，有G1/S、G2/M两个重要的检测点，并受到多种基因表达的调控，这些调控因子尤其是细胞周期负调控基因如p53、p21WAF1等基因的异常表达，可引起检测点的功能下降或丧失，导致突变或受损DNA的积累和细胞的恶性转化。 对许多肿瘤如肝癌、胃癌、鼻咽癌的研究发现，DNA突变或损伤的信号传递给野生型p53蛋白，引起其诱导p21WAF1的转录加强、p21WAF1蛋白增加，p21WAF1是细胞周期通用抑制物，机制之一就是结合增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）从而抑制DNA的复制、G1/S过渡。此外，p53、p21WAF1对G2/M过渡也有抑制作用。当p53基因突变时，突变型p53基因产物具有癌蛋白的功能，且促进p21WAF1转录的功能丧失，DNA受损或突变的细胞进行DNA复制、瘤细胞出现失控性增殖和细胞的恶性转化。 本研究采用免疫组化技术，对32例肾母细胞瘤和7例非瘤肾组织石蜡标本中的p53、p21WAF1和PCNA蛋白进行检测，以探讨p53和p21WAF1在肾母细胞瘤细胞周期调控中的作用，评价p53、p21WAF1和PCNA的检测在肾母细胞瘤的诊断和预后判断方面的应用价值。郑州大学2003届硕士毕业论文肾母细胞瘤中p53、pZlwAF，、PcNA的表达及其临床意义 材料和方法本实验收集1985年一2002年小儿肾母细胞瘤石蜡标本32例 （肿瘤组）和非瘤肾组织石蜡标本7例（对照组），犯例肿瘤患者年龄最小10个月，最大13岁，平均3.47士1 .80岁:‘其中男18例，女14例;左侧19例，右侧13例，患儿术前均未行放疗和化疗。肿瘤组织HE染色切片由两位病理医师明确诊断并作组织学分型，并根据术中情况及病理判定临床肿瘤分期和有无淋巴结转移（按NWTS一3标准）:预后良好的组织结构（FH型）25例，预后不良的组织结构（UH型）7例;r期7例，n期14例，m期8例，W期3例;有琳巴结转移9例，无淋巴结转移23例。采用免疫组织化学技术S一P法检测全部肿瘤组和对照组标本中的p53、pZI娜’和PcNA的表达水平，在每张切片中有P53蛋白表达的阳性细胞数)10%，判定该片为P53蛋白表达阳性，切片无阳性细胞或阳性细胞数百分率<lp%为p53蛋白表达阴性，分别以pZI WAFI和PCNA表达指数（PI和PCI）代表其蛋白的表达水平。应用SPSSIO.0统计软件对实验结果进行统计学处理。 结果（1）肿瘤组犯例中，7例p53表达阳性，阳性率为21.9%，对照组7例无1例表达阳性，统计学分析无显著性差异（尸>0.05）;肿瘤组32例中，PCNA检出率为100%，PCI范围为2%87%，对照组7例PCI范围为O一25%，肿瘤组PCI高于对照组PCI（46.53%士22.13%/16.00%士12.11%）（P<0.01）;肿瘤组中有25例pZI WAF’表达阳性，阳性率为72%，PI范围为8%一83%，对照组7例中3例表达阳性，阳性率42.9%，PI范围为3%一10%，在肿瘤组高于对照组 （46.44%士23.58%/3.57%士3.95%）（P<0.001）。（2）肾母细胞瘤中FH型的p53阳性表达率低于uH型的阳性表达率（8%/62.50，0）（P<0.0一）:FH型的Pel低于UH型的PCI（41.56%士 19.54%/64.29%士23.06%）（P<0.05）:FH型的Pl高于uH型的Pl（53.28%士20.560，0/22.00%士17.046%）（尸切.01）。（3）肿瘤组中无淋巴结转移组的P53阳性表达率低于有淋巴转移组的阳性率（8 .7%/55.6%）（P=0 .01）;无淋巴结转移组PCI低于有淋巴结转移的PCI（40.04%士19.65%/63.11%士20，13%）（P<0.05）;无淋巴结转移组的PI高于有淋巴转移组的pl（52.83%士21.02%/30.11%士22.56%）（P<0.05）。（4）本实验将I一11期与m一IV期分别合并比较，p53在m一W型的阳性率高于I一n期的阳性率（45.5%/9.5%）（P一0.01）;111一IV期的Pel高于I一11期的PCI（60.550，0士19.520，0郑州大学2003届硕士毕业论文肾母细胞瘤中p53、pZlwAF，、PcNA的表达及其临床意义漪狱尹书芬，子妙几二议争汾沪咒韶城形二淤挤沙c分性筋扛扮:黔命一罗;箩万.犷一汾洲华于半刃罗设纤姗左今一屯哆今彩介笋汀一梦仅价仁冷蛇尹，亦/39.19%士20.10%）（尸<0.05）;.111一W期的pl低于I一11期的pl（34.64%士22.94吩52.62%士21.950，0）（尸<0.01）。（5）在7例p53的阳性组的pCI高于25例p53的阴性组的pCI（56.43%士28.03%/42.72%士加.22%）（尸<0 .05）;7例P53的阳性组的Pl与25例p53的阴性组的Pl之间无显著性差异（41.29%士30.83%/47.88%士21.69%）（P>0.05）。 结论（l）本研究显示p53蛋白的表达与肾母细胞瘤的组织学分型、临床肿瘤分期和淋巴结转移相关。（2） PCNA的表达与其组织学分型、临床肿瘤分期和淋巴结转移相关。（3）pZlwAF’的表达与其组织学分型、临床肿瘤分期和淋巴结转移相关。（4） Pcl在p53阳性组高于p53阴性组，说明p53蛋白的表达对肾母细胞瘤细胞