【摘 要】
：
矮化突变是香蕉无性繁殖后代中常见的表型变异之一,迄今,对引起香蕉矮化变异的调控机理的研究尚未获得十分清楚的认识。已有的众多研究结果表明,内源赤霉素是影响植物株高的重要激素之一,赤霉素生物合成途径中的关键酶编码基因的突变会导致植物矮化。为探究赤霉素生物合成途径中的关键酶基因在香蕉矮化中的分子调控机理,本试验以威廉斯B6（Musa AAA Group Cavendish Williams）野生型亲本及
【基金项目】
：
国家现代农业产业技术体系北海综合试验站建设专项（CARS-31）
论文部分内容阅读
矮化突变是香蕉无性繁殖后代中常见的表型变异之一,迄今,对引起香蕉矮化变异的调控机理的研究尚未获得十分清楚的认识。已有的众多研究结果表明,内源赤霉素是影响植物株高的重要激素之一,赤霉素生物合成途径中的关键酶编码基因的突变会导致植物矮化。为探究赤霉素生物合成途径中的关键酶基因在香蕉矮化中的分子调控机理,本试验以威廉斯B6（Musa AAA Group Cavendish Williams）野生型亲本及其矮化突变体为试验材料,根据研究公布的相关基因c DNA序列设计合成引物,通过RT-PCR技术克隆两试验香蕉材料的赤霉素合成途径相关的三个关键酶基因GA2ox、GA3ox、CPS的c DNA序列,并对克隆序列进行测序、序列比对和分析其预测编码蛋白的结构与功能。同时,利用荧光实时PCR技术对克隆基因在两试验香蕉材料的不同发育阶段的假茎、叶片和果实中的转录表达进行定量检测和分析,并构建克隆基因的植物表达载体,进行遗传转化研究其功能。研究获得的主要结果如下:1、克隆得到威廉斯B6矮化突变体和其野生型亲本中的GA2ox、GA3ox、CPS三个基因的相应的六条c DNA序列。将来自矮化突变体香蕉GA2ox、GA3ox、CPS三个基因的克隆序列分别命名为GA2ox-A、GA3ox-A、CPS-A,来自野生型亲本香蕉GA2ox、GA3ox、CPS三个基因的克隆序列分别命名为GA2ox-G、GA3ox-G、CPS-G。测序和序列比对结果显示:GA2ox-A和GA2ox-G的序列长度均为994 bp,开放阅读框均为813 bp,均编码270个氨基酸。二者的氨基酸序列有99.63%的相似性,序列间存在1个位点的氨基酸残基差异;GA3ox-A和GA3ox-G基因的序列长度均为1096 bp,开放阅读框均为864 bp,编码287个氨基酸。二者的氨基酸序列有98.26%的相似性,序列间存在5个位点的氨基酸残基差异;CPS-A和CPS-G基因的开放阅读框全长均为2163 bp,均编码720个氨基酸。二者的氨基酸序列有98.89%的相似性,序列间存在8个位点的氨基酸残基差异。2、GA2ox在矮化突变体叶片、假茎和开花期果实中的表达水平均高于野生型亲本,尤其是在生长前中期的15和20叶龄期,GA2ox在矮化突变体叶片和假茎中的表达水平较野生型高4.3-28.9倍;GA3ox在矮化突变体假茎中的表达水平整体上均低于野生型亲本,其中GA3ox在矮化突变体假茎中的表达水平较野生型低2.2-32倍。但在果实中,GA3ox在矮化突变体中的表达水平显著高于野生型亲本;CPS基因在矮化突变体叶片和假茎中的表达水平均低于野生型亲本。但在果实中,CPS在矮化突变体中的表达水平均显著高于野生型亲本。3、GA2ox-A和GA2ox-G蛋白分子质量分别为30067.30 Da和30085.33 Da,理论等电点分别为5.05和5.04,属酸性蛋白;GA3ox-A和GA3ox-G蛋白分子质量分别为30661.14 Da和30735.28 Da,理论等电点均为9.78,属碱性蛋白。CPS-A和CPS-G蛋白分子质量分别为82412.15 Da和82359.00 Da,理论等电点分别为6.17和6.03,属酸性蛋白。疏水性预测（GRAVY）分析结果发现,矮化突变体及野生型亲本GA2ox、GA3ox、CPS蛋白均属于亲水性蛋白,且均为不稳定性蛋白,均无信号肽,无跨膜结构。二级结构预测结果发现,矮化突变体及野生型亲本GA2ox、GA3ox、CPS蛋白均包括α螺旋、β折叠、延伸链和无规则卷曲四种构象。亚细胞定位预测结果发现,矮化突变体及野生型亲本GA3ox蛋白主要位于线粒体,GA2ox、CPS蛋白主要位于细胞质。保守结构域分析结果显示,矮化突变体及野生型亲本GA2ox、GA3ox、CPS蛋白分别具有GA2ox、GA3ox、CPS基因家族典型的保守结构域。4、构建了GA2ox-A基因的植物表达载体,菌落PCR、测序结果验证了所构建的植物表达载体中克隆基因序列的准确性,完成了构建植物表达载体转化烟草,并且获得10株转GA2ox-A基因再生烟草植株。综上所述,本研究结果揭示了威廉斯B6矮化突变体及其野生型亲本赤霉素合成途径中三个关键酶基因GA2ox、GA3ox、CPS结构间的差异,并且发现GA2ox、GA3ox、CPS基因在矮化突变体及其野生型亲本不同发育期的叶片、假茎和果指中的表达水平均存在显著差异。同时获得转基因再生烟草植株,为进一步研究其功能奠定基础。本研究结果对于揭示香蕉矮秆突变的内在机制具有重要作用。
其他文献
社交媒体的出现改变了壮族人民的传统对歌方式。将理查德·塞勒·林的“数字礼俗社会”概念再语境化，通过线下田野调查与线上参与式观察，研究发现，媒介化的对歌行为创造了新的交往逻辑，并以此形成了不一样的数字礼俗社会。作为连接线下歌圩与虚拟歌场的中介设备，手机微信给歌者带来综合的空间体验；中国式的人情嵌入，诞生了全新的歌场社交礼仪与对歌秩序规则，这种社会逻辑，通过线上与线下的双重互动，不断强化了群成员的身份
当前,高校新生网络成瘾是大学生教育中的一个重要问题,在高校中,因网络成瘾而导致学生旷课、停课、退学甚至心理健康问题时有发生。高校新生正处于角色转变的关键时期,处在这个阶段的青少年需要特别关注,并且随着互联网和电子智能产品的日新月异的发展,互联网以多种形式影响着高校学生的生活和学习,互联网的“双刃剑”的作用在高校学生群体中也越为明显。因此,针对高校新生网瘾问题进行深度探讨具有重大研究意义,如何充分发
＜正＞横陂镇位于恩平市南部，地处恩平、台山、阳江三市交界，总面积200.1平方公里，海域面积7.6平方公里，海岸线长21.2公里。横陂历史悠久，其地域在东周列国时期属于百越人聚居地，汉至隋唐时属俚僚人聚居地，元朝及明朝初期是汉瑶混居地。横陂行政区域变化很大，从明代直至新中国成立之初，地跨台山、开平、阳江、恩平4县6个区，直到1972年后形成现时的固定区域。横陂姓氏之多在恩平11个镇（街）乃至江门全
网络是一把双刃剑,在给我们生活带来极大便利的同时,也让不少群体沉迷于虚拟的世界。由于自身的生理、心理特征,加之青少年正处于成长关键期,网络成瘾严重危害青少年的身心健康、亲子关系甚至是人生发展。然而目前对于青少年网络成瘾的有效治疗方法却较少,主要是心理治疗辅以药物治疗,还有少数治疗机构采用饱受非议的军事化训练甚至是体罚来戒除青少年的网瘾。笔者认为在网瘾戒除的过程中,社会工作可以发挥其他方式所不能替代
丘陵山区地形复杂、路况条件差,一些农用移动转运装备难以进入,导致农产品和农用物资搬运困难,亟需一款具有导航定位精度高、自主控制能力强的自动化移动转运装备。因此,针对丘陵山区路线弯曲迂回、树木遮挡可能导致的卫星定位精度差、卫星定位信号失锁等问题,以实现履带式转运车辆在丘陵山区自主运行为目的,搭建履带式转运车实验平台,研究基于全球卫星定位（GNSS）、惯性导航系统（INS）和激光雷达的融合定位算法和履
本文从生物遗传学“基因”的视角，认为文化传承具有与基因传递类似的特征，即文化基因对文化系统具有控制作用。本文运用文献分析、实地调研、口述历史等研究方法对山西长治上党盆地南缘的荫城古镇文化基因进行梳理，构建了山西荫城古镇文化基因谱系，并从基因传承的视角提出山西古镇保护与发展的建议。
中国是农业生产大国,自农业农村部正式发布《“十四五”全国农业农村科技发展规划》以来,实现农业机械自主导航成为农业中降低劳动强度和提升作业效率及质量的关键。本文结合四轮驱动液压底盘技术和农业机械自主导航控制技术,对基于自主导航四轮驱动液压底盘进行研究,旨在通过该研究提高农业机械自主导航过程中的行驶稳定性和路径跟踪精度。主要进行以下几点研究:（1）本文主要以植保机功能需求设计了四轮驱动液压底盘总体方案
日本怪兽电影作为日本电影类型的标志之一,源自于日本民众对核辐射的恐惧心理,怪兽电影不仅在日本国内风靡一时,也影响到了好莱坞的电影创作。东宝公司作为日本怪兽电影的开创者,利用怪兽可怖的形象将日本的民族心理具象化,其间银幕中的怪兽也在不断地发生改变,这种变化象征着日本传统制片厂受市场因素的影响主动寻求出路。可是,作为日本电影标志之一的怪兽电影,对其讨论的结果往往将电影置于单一社会情感的话语下,而从电影
文明植根于人的实践的存在方式，表征着人类自身对美好生活的追求，这一概念的背后是一种启蒙主义的进步观念。文明既指人类社会发展的历史过程，也指人类社会发展所达到的历史成就，更重要的是表达了整个人类的社会存在的理想。但是，在人类文明的发展进程中，西方自身的文明概念却异化成了两种意识形态：作为殖民主义的意识形态和作为种族主义的意识形态。文明为西方推行殖民主义提供了合法性辩护，同时也成为论证其种族优越性的合
扶持人口较少民族发展政策2005年诞生至今已成为一项连续的重大公共政策，深刻影响着我国人口较少民族的发展。反思政策制定的缘由、实施过程，并对政策效果进行分析发现，这项公共政策的预期目标并未全部实现，影响政策效果的因素主要有政策目标与群众实际需求存在差异、人口较少民族地区资源缺口较大、没有充分考虑扶持对象的意愿等，在今后的政策制定和执行过程中要针对这三个因素做出适当调整。