碱茅水孔蛋白基因(PutPIP1)的功能解析

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水是生命的重要要素,水的流入和流出细胞主要是通过细胞膜上存在的水孔蛋白完成的。植物水孔蛋白可分为四个家族,其中PIP1作为一种质膜内在蛋白(Plasma membrane intrinsic proteins, PIPs)在植物的生理生化过程中具有重要作用。本课题通过构建碱茅的cDNA文库,并通过对文库库容进行检测,得到了一个具备较高的库容,并且具有完整性和代表性的碱茅cDNA文库。从碱茅的cDNA文库中克隆得到了水孔蛋白基因(PutPIPl),对基因的生物学信息、表达特性、酵母亚细胞定位以及转基因植株的逆境适应性进行解析。通过对PutPIP1基因的生物学信息分析,表明PutPIP1基因属于水孔蛋白家族中的质膜内在蛋白的PIP1亚类,而且具有6个跨膜结构。通过对PutPIP1基因的表达特性的分析,PutPIP1在野生碱茅各组织器官的转录水平特性进行研究,表明PutPIP1在碱茅的各部位中均有一定量的表达,并且该基因的表达具有一定范围内的组织特异性。将重组质粒pYES2-GFP-PutPIP1转入酵母细胞,PutPIP1与绿色荧光蛋白融合,同时以GFP为对照,诱导该基因表达,证明PutPIP1定位于酵母的质膜上。在逆境条件下,PutPIP1基因的表达在一定范围内增强酵母对NaCl和Na2CO3的耐受性,在低NaHCO2逆境条件下,没有表现出耐性趋势。
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