论文部分内容阅读
目的：通过研究广西不同地区肝细胞癌(HCC)人群乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)及黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFBl)双暴露水平下β-catenin基因的突变、mRNA及蛋白的表达水平,对β-catenin基因在双暴露及单暴露不同情况下突变、转录及表达做初步的研究。材料与方法：对广西不同地区108例HCC患者根据乙肝病毒与黄曲霉毒素的暴露情况,分为HBV(+)/AFB1(+)(实验组A)共48例；HBV(+)/AFB1(-)(对照组B)共27例；HBV(-)/AFB1(+)(对照组C)共19例；HBV(-)/AFB1(-)(对照组D)共14例。另收集20例肝血管瘤肝切除、肝移植供体肝组织作为正常肝组织对照组,分别为HBV(-)/AFB1(+)10例,HBV(-)/AFB1(-)10例。通过PCR直接测序、RT-PCR和免疫组织化学(Immunohistochemistry, IHC)法分别检测β-catenin基因第三外显子的突变,转录及蛋白的表达情况。结果：(1)108例HCC患者中β-catenin基因的突变率为11.1%(12/108),β-catenin基因的突变热点为S37,T41,占总突变的91.7%(11/12)。其中在实验组A和对照组B、对照组C和对照组D的阳性率分别为14.5%(7/48)、3.7%(1/27)、21.1%(4/19)、0%(0/14)；正常对照组中未发现突变。经统计学检验,其突变率差异在4个亚组间不具统计学意义p>0.05)。(2)β-catenin mRNA的表达：β-catenin基因mRNA在4个亚组中的表达半定量灰度值分别为：A组为1.13±0.14；B组为1.06±0.12；C组为1.16±0.18；D组1.01±0.13：正常对照组为0.085±0.13。其中,HBV/AFB1双暴露组即A组、AFB1单暴露组即C组分别与HBV/AFB1双暴露阴性组即D组相比,其差异均具有统计学意义(P=0.03,P=0.03)。(3)在β-catenin蛋白表达方面,β-catenin蛋白表达在108例HCC组织阳性表达率为70.0%(75/108)。β-catenin蛋白表达在组A组,B组,C组,D组的阳性率分别为70.8%(34/48)、66.6%(18/27)、78.9%(15/19)、57.1%(8/14)。其阳性率差异在4个亚组间均不具统计学意义(P>0.05)结论：1,广西地区,肝癌β-catenin基因突变率为11.1%,密码子41,37位点为其突变热点。2,β-catenin第三外显子的突变和β-catenin mRNA的转录水平增高是β-catenin蛋白过表达的两个原因。3,β-catenin第三外显子的突变和β-catenin mRNA的转录升高可能与广西地区的黄曲霉毒素高暴露有关。