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目的研究12-氧-十四烷酰佛波醇-13-癸酰酯(TPD)对小鼠肠道急性放射损伤的保护作用及其可能的机制。方法一、动物试验:(一)建立小鼠肠道急性放射损伤模型。将12只6-8周的雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别为对照组,照射组(6Gy、8Gy、10Gy),每组3只。对照组小鼠不进行照射,照射组小鼠按照各组别的不同剂量进行全身均匀照射。照射后每天观察并记录小鼠的一般状况,如精神状况,活动度,饮食情况。照射后3.5天颈部脱臼法处死小鼠取空肠组织,通过HE染色方法,镜下计数照射3.5天后小鼠小肠隐窝数。(二)探究TPD对全身均匀照射10Gy60Coγ小鼠生存周期及其活动情况的影响。将20只6-8周的雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别为对照组、TPD组(25μg/Kg,50μg/Kg,100μg/Kg),每组5只。对照组小鼠照射前经尾静脉给药的方式连续注射生理盐水3天,TPD组小鼠照射前经尾静脉给药的方式连续注射TPD 3天。照射后每天观察并记录小鼠生存时间、精神状态及活动情况,连续观察20天。(三)探究TPD对全身均匀照射10Gy60Coγ小鼠3.5天小肠隐窝细胞数量的影响。将20只6-8周的雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别为对照组、TPD组(25μg/Kg,50μg/Kg,100μg/Kg),每组5只。对照组小鼠照射前经尾静脉给药的方式连续注射生理盐水3天,TPD组小鼠照射前经尾静脉给药的方式连续注射TPD 3天。照射3.5天后,脱颈处死小鼠取空肠组织,通过免疫组化Ki67染色方法,镜下计数照射3.5天后小鼠小肠隐窝数。二、细胞实验:探究TPD对照射IEC-6细胞增殖的影响。将处于对数生长期的IEC-6细胞随机分为对照组及TPD组。照射前12小时(1nM)TPD处理TPD组细胞,采用CCK-8法分别检测照射后第0天,第1天,第2天,第3天,第4天对照组及实验组细胞增殖情况。结果一、动物试验:(一)照射组中照射剂量为10Gy的BALB/c小鼠经60Coγ射线全身均匀照射后,镜下计数小肠隐窝数平均为9个。小鼠出现明显的活动度降低、精神萎靡、毛发脱落、饮食减少、腹泻等临床表现,符合肠道急性放射损伤的典型临床表现。(二)TPD给药组(100μg/Kg)平均存活时间为10d,对照组小鼠平均存活时间为4.2天,给药组小鼠较对照组小鼠脱毛现象减少,饮食增多,活动度提高。给药组较对照组明显延长了照射后小鼠的生存时间。(三)TPD给药组(100μg/Kg)平均隐窝数量为35个,对照组平均隐窝数量为11个,给药组较对照组明显增加了照射后小鼠的小肠隐窝数量。二、细胞实验:TPD可促进照射后IEC-6细胞的增殖。TPD组IEC-6细胞的增殖能力在照射后的前4天逐步上升,对照组的IEC-6细胞增殖的能力明显低于给药组。结论动物实验及细胞实验证实,12-氧-十四烷酰佛波醇-13-癸酰酯(TPD)对小鼠肠道急性放射损伤有保护作用,其作用机制可能是通过促进小肠隐窝细胞的增殖、增加小肠隐窝的数量来实现的。