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目的:Daxx(death domain associate protein死亡结构域相关蛋白)是一种多功能核蛋白,在细胞凋亡、转录调控、病毒感染等方面发挥重要作用。E2F1( E2 promoter binding factor-1,E2启动子结合因子-1)转录因子,是E2F家族的重要成员,在调节细胞周期进程和调节细胞增殖过程中起关键作用,其过度表达能刺激细胞增殖。本实验通过应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidinperosi-dase, SP)方法检测急性白血病患儿骨髓细胞中Daxx和E2F1的表达情况,探讨二者在白血病发病中的作用,为儿童白血病的发生发展机制提供新的思路,为其早期诊断提供理论依据,也为白血病的早期防治提供新靶点。方法:1病例及分组:本研究将2008年6月-2009年6月于我院确诊的初诊未治急性白血病患儿40例作为观察组;包括急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)组23例、急性髓细胞性白血病(acute myelocytic leukemia, AML)组17例。ALL组包括L1 3例、L2 20例、无L3病例,其中高危7例,标危16例;AML组包括M2 4例、M3 4例、M4 4例、M53例、M6 1例、M7 1例、无M1病例。另将性别和年龄与观察组相匹配的20例非恶性血液病患儿作为对照组。2标本采集及处理:分别抽取观察组和对照组每个患儿骨髓液0.2ml,涂片后4℃丙酮固定30分钟,-20℃保存备用,之后应用免疫组化SP法检测Daxx和E2F1的表达。3统计学分析:应用SPSS13.0统计学软件对所得数据进行卡方检验(或Fisher确切概率法)及相关分析;以P<0.05为差异具有显著性意义结果:1 Daxx的表达情况1.1 Daxx蛋白在观察组患儿中的阳性表达率(40%)明显高于对照组(10%),两者间的差异具有显著性(χ2=5.71,P<0.05)。1.2 Daxx蛋白在AML组患儿中的阳性表达率(58.8%)高于ALL组(26.1%),两者间的差异具有显著性(χ2=4.365,P<0.05)。1.3 Daxx在ALL- L1组患儿中的阳性表达率(33.3%)与ALL- L2组(25%)相比,两者间的差异无显著性(P=1, P>0.05)。1.4 Daxx在ALL高危组的阳性表达率(57.1%)明显高于标危组(12.5%),两者间的差异具有显著性(P=0.045,P<0.05)。Daxx在ALL高危组的阳性表达率与对照组(10%)相比,两者间的差异具有显著性(P=0.024,P<0.05);Daxx在ALL标危组的阳性表达率与对照组相比,两者间的差异无显著性(P=1.0,P>0.05)。1.5 Daxx在17例AML组各亚型组中的阳性例数依次为3例、3例、2例、2例、0例、0例。阳性率依次为75%、75%、50%、66.67%、0%、0%。因M6、M7各仅有1例且无阳性表达,故将M2、M3、M4、M5各组间进行卡方检验。各组表达水平间差异无显著性(P>0.05)。1.6 Daxx阳性组的缓解率(56.3%)低于阴性组(91.7%),两者间差异具有显著性意义(P<0.05)。2 E2F1的表达情况2.1 E2F1在观察组患儿中的阳性表达率(57.5%)明显高于对照组(20%),两者间的差异具有显著性(χ2=7.576,P<0.05)。2.2 E2F1在AML组患儿中的阳性表达率(64.7%)与ALL组(52.2%)相比,两者间的差异无显著性(χ2=0.628,P>0.05)。2.3 E2F1在ALL-L1组患儿中的阳性表达率(33.3%)与ALL-L2组(55%)相比,两者间的差异无显著性(P=0.59, P>0.05)。2.4 E2F1在ALL高危组的阳性表达率(71.4%)与标危组(56.3%)相比,两者间的差异无显著性(P=0.657,P>0.05)。E2F1在ALL高危组的阳性表达率与对照组(20%)相比,两者间的差异具有显著性(P=0.023,P<0.05)。E2F1在ALL标危组的阳性表达率与对照组相比,两者间的差异具有显著性(χ2=5.063,P<0.05)。2.5 E2F1在17例AML组在各亚型组中的阳性例数依次为3例、3例、3例、2例、0例、0例。阳性率依次为75%、75%、75%、66.67%、0%、0%。因M6、M7各仅有1例且无阳性表达,故将M2、M3、M4、M5各组间进行卡方检验。各组表达水平间差异无显著性(P>0.05)。2.6 E2F1阳性组的缓解率(69.6%)低于阴性组(88.2%),两者间差异无显著性(P>0.05)。3.在观察组患儿中,Daxx与E2F1的表达水平进行相关分析:χ2=14.339,P<0.05,说明二者呈正相关关系。结论:1 Daxx和E2F1在儿童急性白血病初诊时为高水平表达,提示它们可以作为急性白血病的一种检测指标。2 Daxx在AML中的表达水平高于ALL,说明它的表达与AL的分型具有一定相关性。Daxx阴性组在AL中的缓解率高于阳性组,说明Daxx可能成为提示儿童AL临床预后的指标之一。3实验表明Daxx与E2F1在儿童急性白血病中表达正相关,提示二者在儿童急性白血病的发生发展过程中可能存在某种协同作用。