【摘 要】
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目的:研究泛素样含PDH和环指域1(UHRF1)对甲状腺乳头状癌雌激素受体ERα和ERβ表达及其发生发展的影响。方法:应用免疫组化(IHC)、Real-time PCR检测正常甲状腺组织和甲状腺乳头状癌组织中UHRF1、雌激素受体ERα和ERβ的蛋白及mRNA表达情况;Western blot、Real-time PCR检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1、甲状腺乳头状癌细胞BCPAP和K1中
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目的:研究泛素样含PDH和环指域1(UHRF1)对甲状腺乳头状癌雌激素受体ERα和ERβ表达及其发生发展的影响。方法:应用免疫组化(IHC)、Real-time PCR检测正常甲状腺组织和甲状腺乳头状癌组织中UHRF1、雌激素受体ERα和ERβ的蛋白及mRNA表达情况;Western blot、Real-time PCR检测正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1、甲状腺乳头状癌细胞BCPAP和K1中UHRF1、雌激素受体ERα和ERβ的蛋白及mRNA表达情况;Real-time PCR检测UHRF1过表达或干扰对雌激素受体ERα和ERβ的mRNA表达影响;甲基化特异性PCR(MSP)检测UHRF1过表达或干扰对雌激素受体ERα和ERβ基因启动子区甲基化程度的影响;MTT、Transwell分别检测UHRF1过表达或干扰对甲状腺细胞增殖、侵袭和迁移影响。结果:与正常甲状腺组织比较,甲状腺乳头状癌组织中UHRF1和ERα的蛋白及mRNA表达显著增高,而ERβ的蛋白及mRNA表达显著降低;在甲状腺组织中,UHRF1蛋白表达与ERα蛋白表达呈正相关,而与ERβ蛋白表达呈负相关;高UHRF1、ERα的蛋白及mRNA表达水平和低ERβ的蛋白及mRNA表达水平与甲状腺乳头状癌的恶性癌变过程有相关性。与正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1比较,在甲状腺乳头状癌细胞BCPAP和K1中,UHRF1和ERα的蛋白及mRNA表达水平明显增高,而ERβ的蛋白和mRNA表达水平明显降低;在甲状腺细胞中,UHRF1的蛋白和mRNA表达水平与ERα/ERβ的蛋白及mRNA比率呈正相关;甲状腺乳头状癌细胞中UHRF1的蛋白及mRNA表达水平与ERα/ERβ的蛋白及mRNA比率显著高于正常甲状腺细胞。对细胞进行UHRF1过表达或干扰处理后,ERαmRNA表达水平与之变化趋势相同,而ERβmRNA表达水平与之变化趋势相反;UHRF1上调ERβ基因启动子区甲基化程度,而对ERα基因启动子区甲基化程度无影响;UHRF1促进正常甲状腺细胞Nthy-ori3-1、PTC细胞BCPAP和K1增殖、侵袭和迁移。结论:UHRF1通过表观遗传学抑制雌激素受体ERβ表达的同时促进ERα表达,进而上调雌激素受体ERα/ERβ比率促进甲状腺乳头状癌发生发展。
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