目的：单核/巨噬细胞的趋化运动是机体免疫应答、炎症反应、肿瘤转移的重要环节。我们之前的研究已表明PKCζ是调节单核/巨噬细胞趋化运动的关键分子。在对PKCζ进行蛋白组学研究时,采用质谱分析的方法筛选并鉴定了一个PKCζ的新结合分子-C1QBP。我们前期研究发现应用小RNA干扰技术C1QBP沉默可以抑制CSF-1诱导的单核/巨噬细胞的趋化运动。由此提出：C1QBP可能通过调控PKCζ的活性来调节单核/巨噬细胞的趋化运动。本研究拟建立C1QBP低表达细胞株,探讨其对单核/巨噬细胞迁移、黏附能力的影响,初步明确C1QBP在单核/巨噬细胞趋化运动中的作用机制。本研究初步阐明了C1QBP通过PKCζ调控单核/巨噬细胞趋化运动的作用机理,对深入探讨炎症性疾病的发病机制和探索防治肿瘤的新措施具有重要意义。方法：1.用免疫共沉淀的方法检测PKCζ与C1QBP的相互作用。2.用免疫荧光的方法检测C1QBP与PKCζ在细胞中的定位情况。3.应用StealthTM NA降低单核/巨噬细胞中C1QBP蛋白的表达水平,用Western Blotting验证其表达。4.应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术构建C1QBP稳定降表达的小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7细胞系,用Western Blotting验证其表达。5.用趋化运动实验和肌动蛋白聚合实验检测C1QBP降表达对人单核/巨噬细胞THP-1细胞系的运动能力的影响。6.用趋化运动实验和细胞黏附实验检测C1QBP降表达对C1q、CSF-1、MCP-1诱导的小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7细胞系的运动能力的影响。7. Western Blotting方法检测C1QBP降表达对Clq、CSF-1、MCP-1诱导的PKCζ及其下游通路蛋白活化程度的影响,进一步明确C1QBP在调控单核/巨噬细胞趋化运动中的分子机制。结果：1.免疫共沉淀结果表明C1QBP能与PKCζ相互作用。2.共聚焦显微镜观察C1QBP及PKCζ在细胞质和细胞膜中都有表达,并且两种蛋白可以共定位。3.应用StealthTM NA转染单核/巨噬细胞后,Western Blotting检测C1QBP蛋白表达明显下降。4.应用慢病毒介导的RNA干扰技术成功建立C1QBP稳定降表达的小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7细胞系,Western Blotting验证C1QBP蛋白表达明显下降。5.与对照组相比,C1QBP降表达的THP-1细胞的趋化运动能力、F-actin聚合能力明显减弱(P<0.01)。6. C1QBP表达下降可明显抑制由补体C1q、趋化因子CSF-1诱导的单核/巨噬细胞的趋化运动能力和Clq、CSF-1、MCP-1诱导的细胞黏附能力(P<0.05)。7. C1QBP降表达后,Clq、CSF-1诱导的PKC ζ、integrin β、cofilin磷酸化减少,对MCP-1诱导的活化无明显作用。结论：1. C1QBP通过调节PKCζ的活化来调节单核/巨噬细胞的趋化运动和聚合。2. C1QBP参与调控C1q、CSF-1诱导的单核/巨噬细胞的趋化运动和C1q、CSF-1、MCP-1诱导的细胞黏附。3. C1QBP参与调控趋化因子诱导的单核/巨噬细胞的趋化运动和黏附的作用机制是C1QBP参与调控趋化因子诱导的PKCζ下游及下游蛋白intergrin β、 cofilin的磷酸化。4. C1QBP是调节趋化因子诱导的单核/巨噬细胞趋化运动的关键信号分子之一。