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目的通过建立LPS诱导体外培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤模型,探讨1、Fas-siRNA转染肺泡Ⅱ型上皮细胞的可行性;2、Fas-siRNA对Fas/FasL依赖的LPS诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡和炎症反应的影响。方法经分离纯化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分为5组:空白组:AECⅡ(仅加脂质体)、AECⅡ+siRNA-213组、AECⅡ+siRNA-641组、AECⅡ+siRNA-830组、AECⅡ+阴性对照siRNA组。6h后观察转染效率,48h后RT-PCR检测Fas mRNA表达。肺泡Ⅱ型上皮细胞分为5组:对照组、LPS组、LPS+FasL组、FasL组、LPS+FasSiRNA+FasL组,转染FasSiRNA后20小时,加入LPS和FasL,加入PBS为每孔容积1ml,终浓度分别为10ug/ml和5ng/ml,继续培养48小时,RT-PCR、Westen Blot检测Fas的表达,Westen Blot检测p-caspase8,流式检测细胞凋亡,ELISA检测培养液上清MCP-1和TNF-a的浓度。结果1、siRNA转染效率超过80%,与空白组与阴性对照组比较,AECⅡ+siRNA-213组、AECⅡ+siRNA-641组、AECⅡ+siRNA-830组Fas-mRNA表达抑制(p＜0.05),AECⅡ+siRNA-641组Fas-mRNA表达最低(p＜0.05);2、与control组比较,LPS组、LPS+FasL组FasmRNA、Fas蛋白表达增加(p＜0.05),FasL组、LPS+FasSiRNA+FasL组Fas mRNA、Fas蛋白表达未见明显差异(p＞0.05);与LPS组比较,LPS+FasSiRNA+FasL组Fas mRNA、Fas蛋白表达明显下调(p＜0.05);与control组比较,LPS组、FasL组、LPS+FasL组、LPS+FasSiRNA+FasL组肺泡Ⅱ型上皮细胞p-caspase表达、细胞凋亡和细胞培养液上清TNF-α和MCP-1浓度明显增加(p＜0.05);与LPS组比较,LPS+FasL组肺泡Ⅱ型上皮细胞p-caspase表达、细胞凋亡和细胞培养液上清TNF-α和MCP-1浓度明显增加(p＜0.05);与LPS+FasL组比较,LPS+FasSiRNA+FasL组p-caspase表达和细胞凋亡减少,TNF-α和MCP-1浓度明显下降(p＜0.05)。结论Fas-siRNA成功转染原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞;Fas基因沉默可减轻Fas/FasL系统依赖的LPS诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡和炎症反应。