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前言 NMDA受体主要分布在中枢神经系统中，在神经系统的功能活动中起十分重要的作用，它既在神经系统的信息传递中发挥作用，又控制神经系统的基因表达。它的活动是由谷胺酸和甘胺酸的水平来控制的，NMDA受体在参与正常神经系统的活动的同时，也与神经系统的损伤和各种病理过程的发展关系密切。而且NMDA受体还与各种急慢性疼痛的病程发展有关。有许多研究表明吸入麻醉药对NMDA受体有抑制作用。有关镁和氯胺酮对NMDA受体的影响研究也很多，二者均被认为是NMDA受体的拮抗剂。在我们临床麻醉过程中常常涉及到镁、氯胺酮和吸入麻醉药的应用，所以本实验中我们旨在研究临床应用浓度的吸入麻醉药与氯胺酮联合应用时对NMDA受体的作用效果，以期揭示它们之间在NMDA受体中的相互作用关系。 材料和方法 首先获取蛙卵细胞（Xenopus Oocyte），并进行处理去掉表层的卵泡，然后应用微量注射器，将含有NR1A，NR2A或NR1A，NR2B的cNDA 3ng（9nl）注射到每个卵细胞核中，NB1与NR2的cDNA质量比为1：5。然后将注射有cDNA的卵细胞置于营养液中，在18℃下进行培育，7～10天后受体即可表达。应用双极电压钳进行电生理测定，支持电压为-70mV。应用谷胺酸和甘胺酸做为激动剂和辅助激动剂。测试液中以Ba2+做为电解质，以消除Ca2+介导的细胞内Cl-电子流对实验的影响，分别测试各种药物对NMDA受体的影响，并观察它们的相互作用。 结 果 实验结果E…表明：未注射CDNA的卵细胞采用谷氨酸和甘氨酸测试，未测到反应电流；而注射过CDNA的卵细胞则可以测得一内向电流，且其具有NMDA受体电反应特征，说明受体已成功得到表达。谷氨酸的 EC。在 NRI／NRZA和 NRI／NRZB受体中分别是（3．2。0．二）x 10“‘mol和（4．9 to．7）x 10－‘mol，Em。（最大反应电流观分别为o．4。O．01）d和p．5。O．4)m人，统计结果表明：两种受体亚型中谷氨酸的 ECS。无差别h ＝＝ 0．76入而 Emax贝u NRI／NRZA明显大于 NRI／NRZB（P＝0．03）。甘氨酸的 EC。在NRI／NRZA和NRI／NRZB中分别为（l．5 ic．5）X10－’mol和门．8。3．5)xlo－’mol，无统计学差异；而Emax分别为（3．0。0．2）InA和（2．0。0．二）d，统计学差异显著（p＜0．001）。镁对＊m／＊mA和＊m／＊mB的1＊分别为（4．2土互．2）x10－Vo且和（6．3。2．4）x 10Amol，两组无明显差异。应用r。。的镁测试不同浓度的谷氨酸O0乃一10一mol)发现 Emax明显变小，而 EC。的变化则不明显。测试S（＋）一氯胺酮对受体的影响，得其IC。在NRI／NRZA和NRI／NRZB中分别为（4．IL 2．5）X m－‘m1和（3．0土 0．3）x 10－‘mol，无差另。当应用 IC扣的 S（＋）一氯胺酮测试其对谷氨酸的浓度一效应的影响时发现E一在两种受体中均降低，而EC。。变化则不明显。将镁和S（＋）一氯胺酮按一定比例配制成不同浓度测试受体反应电流时，计算得镁在NRI／NRZA中的IC。。为门 土1．7)xlo－‘mol，同单独应用时相比显著降低（p＜0．001），S（＋）一氯胺酮的IC。为（0．12。0．01）xlo－‘mol，也明显降低b＜0．001人在 NRVNRZB中情形也相似，二者的 IC。分 ，2·别为（27if．8）X10－‘mol（p＝0．003）和（0．1910．of）x10－‘molh＜0．001人实验结果显示各种吸人麻醉药对受体均有抑制作用，各自的兀。很接近MAC值。镁和s（＋）一氯胺酮可使吸人麻醉药的 IC。。明显降低师＜0．05人当二者联合应用时则能使吸人麻醉药的 IC。。更显著地降低帅＜队 of人 讨 论 我们的实验结果表明氯胺酮和镁均能抑制重组NRI／NRZA和 NRI／NRZB受体的反应。当联合应用时H者有相加作用。这可以部分地解释为什么二者联合应用时具有更有效的镇痛作用。NRI／NRZA和NRI／NRZB与麻醉的关系显得较为重要，故我们在本实验中选择了二者进行研究。我们的研究结果表明：通道阻滞剂，如氯胺酮和镁对表达于卵细胞上的 NRI／NRZA和 NRI／NRZB受体的作用无差异，说明它们的作用部位及机制可能相同或相似。 我们的观察结果表明氯胺酮和镁对NMDA受体的作用具有相加性。有人应用鼠做在体实验表明，当体内镁缺乏时，氯胺酮的作用效果降低，而同时应用镁时则可显著增强氯胺酮的作用，这与我们的实验结果是相吻合的。 实验结果表明同临床应用浓度相关的异氟醚、地氟醚和七氟醚能够抑制表达于卵细胞上的NMDA受体。这种抑制作用是可逆的，具有浓度相关性，无电压敏感性，很可能是因为吸人麻醉药均作用在NRI亚单位上。另外，吸人麻醉药的效能能明显被S（＋）一氯胺酮和镁增强，当同时与镁和氯胺酮应用时，效果则更加显著。所以吸人麻醉药可以增强镁和氯胺酮的镇痛作用；同样地也可以增强镁和氯胺酮的脑保护作用。 另外这三种吸人麻醉药的流J常接近各自的＊址。这种麻醉药的强度和对NMDA受体抑制的关系显示它们对脑部和脊髓