NRP1靶向肽的筛选、鉴别、应用

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目的:NRP1的高表达与肿瘤的恶性进展有关,通过噬菌体展示技术筛选出具有特异性靶向乳腺癌细胞的小分子靶向肽,利用靶向肽构建分子探针后行近红外荧光显像和SPECT成像;方法Ph.D-CX7CTM噬菌体展示肽库与MDA-MB-321结合后,经3轮淘洗,通过ELISA和DNA测序鉴定出靶向肽CK3(LKADKAK)。再通过体内(免疫荧光、凋亡实验)和体外(近红外荧光成像)实验验证CK3具有良好的靶向性;99mTc直接法标CK3构建分子探针行SPECT成像;结果:(1)Phage56与MDA-MB-231结合的滴度最高;(2)经核苷酸测序结果表明CK3属于CendR;(3)实验验证CK3的直接作用受体为NRP1;(4)99mTc-CK3在荷乳腺癌裸鼠体内特异性聚集;结论:(1)通过噬菌体展示技术筛选出一条特异性靶向NRP1阳性的乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的肽CK3;(2)利用体内及体外方法验证CK3靶点为NRP1,属于CendR;(3)近红外成像与SPECT成像显示CK3具有靶向性。利用CK3及其突变体,构建99mTc-CK3是一种肿瘤靶向分子显像剂。为特异性诊断早期乳腺癌提供了一种新的策略。
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