毛细管电泳作为一种常规的分离技术已被广泛应用在化学及生物化学的各个领域。与其它分离方法(如HPLC)相比，毛细管电泳具有高效、快速、低耗等优点。但是，由于毛细管内径小，检测光程短，从而限制了检测灵敏度的提高。通过样品浓集的方式增强检测信号是提高检测灵敏度的一个非常有效的途径。本文采用HF对毛细管柱上的一小段(0.2-0.3 cm)进行原位刻蚀，成功地制作了半透性质的膜结构，这种膜结构可以使小分子(或离子)通过而大分子(如蛋白质分子)不能通过，利用这种性质可以对蛋白质进行在线预浓集。本文对溶菌酶和牛血清白蛋白进行浓集，浓集倍数分别达309、182。 毛细管原位刻蚀而成的膜结构具有使用简便、无死体积等优点。虽然早在1997年，就有人采用HF对毛细管进行原位刻蚀，但由于膜结构非常薄弱在刻蚀过程中以及使用过程中，极易断裂，因此该技术并没有得到广泛的应用。这就需要对刻蚀技术进行进一步的改进。本文中，针对这一问题，对毛细管刻蚀部分进行平板固定，减少了外力对刻蚀部分的影响；并采用碱性电解质在毛细管电通透时抑制HF的进一步刻蚀，以防止毛细管被过度刻蚀，有效地改进了毛细管原位刻蚀制作膜结构的技术。 蛋白质毛细管电泳中，电渗流和蛋白质吸附是影响分离效率以及结果重现性的两大因素。本文中采用极端pH和添加剂技术抑制电渗流和蛋白质的吸附，成功地建立了一种以50 mmol/L Tris-H<,3>PO<,4>(pH 2.50)为缓冲溶液，添加了Dextran T-2000的蛋白质毛细管电泳分离体系。实验表明，极端pH可以有效的抑制电渗流；Dextran.T-2000不仅具有抑制蛋白质吸附的作用，还能有效地改善混合蛋白的分离效率。