类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜组织过度增生，骨与软骨破坏为主要特征的全身性慢性自身免疫性疾病，其发病机理目前还不清楚。Cyr61是一种细胞外基质蛋白，广泛参与调控细胞增殖、粘附、迁移、分化、损伤修复和胚胎发育等多种功能。本课题组前期研究结果发现，Cyr61蛋白在类风湿性关节炎病人成纤维样滑膜细胞(FLS)中高表达，具有促进滑膜细胞增殖及抑制其凋亡的作用。炎症因子IL-17可通过NF-κB和AP1信号途径上调FLS表达Cyr61。这一研究结果首次证明Cyr61参与了RA滑膜组织的过度增生，并提示Cyr61与炎症细胞(Th17)之间存在密切关系。Th17细胞通过分泌炎症因子IL-17调控FLS表达Cyr61，那么，FLS能否反过来通过分泌Cyr61调控Th17细胞分化呢？其转录后调控又是如何的呢？本研究目的是研究Cyr61在Th17细胞分化中的作用及其转录后调控机制。　　首先，我们研究了Cyr61在Th17细胞分化中的作用。通过ELISA检测，我们发现RA病人滑液中IL-6的水平是升高的，而Cyr61蛋白可通过αvβ5-Akt-NF-κB信号通路途径促进FLS产生IL-6。采用Transwell系统将FLS和CD4+T细胞共培养，发现Cyr61刺激的FLS可促进CD4+T细胞往Th17细胞分化，而干扰内源性Cyr61的FLS则失去这种促分化能力。在体内，用特异性小鼠抗人Cyr61单克隆抗体093G9阻断CIA小鼠体内Cyr61蛋白作用，可明显抑制Th17细胞分化和小鼠关节炎症。表明Cyr61可作为一种“前炎症因子”促进Th17细胞分化，加剧RA关节局部炎症反应。　　接下来，为进一步探索Cyr61上述病理性功能的作用表位，我们采用噬菌体库筛选方法明确了093G9的结合表位为LPNLGCP，位于Cyr61蛋白的VWC结构域140-146位氨基酸。这提示Cyr61的VWC结构域可能是一个功能性结构域，在RA滑膜增生和炎症中起重要作用。　　最后，我们对Cyr61的转录后调控进行了研究。由于目前关于Cyr61的转录后调控报道还甚少。在RA中，还没有关于Cyr61的转录后调控报道。因此我们首先通过常用的软件预测可能参与Cyr61调控的miRNA。经过比对和筛选，我们选择用TargetScan预测的miR-22进行实验，发现miR-22的确可结合在Cyr613UTR，抑制Cyr61转录后表达。进而，通过Taqman探针检测，我们发现miR-22在RA滑膜组织中表达降低，从而使得Cyr61表达升高，进一步功能实验证实了转染miR-22后RAFLS中的Cyr61表达降低，FLS的粘附，增殖和迁移都随之降低。那么，RA中miR-22为何表达降低呢？通过构建p53质粒和miR-22启动子区Luc报告基因质粒，我们发现p53能够结合在miR-22的启动子上促进miR22表达。而在RA中，通过p53外显子测序，我们发现p53是突变的，因而不能启动miR-22表达，使得miR-22表达降低。这不仅阐明了Cyr61的转录后调控机制，也拓展了p53的生物学作用，提示p53不仅与细胞增殖相关，还能够通过对Cyr61转录后调控而间接参与其对于Th17细胞分化的影响及RA的炎症反应。　　总之，我们证实了在RA中，Cyr61可通过诱导RAFLS分泌IL-6促进Th17细胞分化;RA滑膜细胞p53突变不能启动miR-22致Cyr61过表达。这些结果进一步阐明了Cyr61在RA炎症微环境中的功能及其转录后调控机制，为最终靶向Cyr61治疗RA提供理论依据和实验基础。