论文部分内容阅读
目的:探究MMP-2在泡球蚴在宿主肝内侵袭性生长、转移的作用。方法:14w龄健康雌性昆明小鼠245只,将小鼠随机分为以下7组。A组:空白对照组;B组:阴性对照组;C组:模型对照组;D组:空载体腺病毒组;E组:阴性序列腺病毒组;F组:MMP-2干扰腺病毒预处理组;G组:MMP-2干扰腺病毒组。A、B、C三组小鼠不实行干预,D、E、G、F四组小鼠分别尾静脉注射空载体腺病毒、阴性干扰腺病毒、MMP-2干扰腺病毒、PBS。建立100天后对各组小鼠行安乐死大体观察每组肝泡球蚴生长情况,计算各组肝脏E. m感染率、囊湿重及减蚴率。HE染色观察组织形态学改变,TUNEL法检测远处肝细胞、近穿刺部位或近E. m肝细胞和肝E. m组织周围炎细胞凋亡指数(apoptotic index, AI),ELISA法检测各组小鼠血清MMP-2、TIMP-2的表达。采用Caspase-3活性试剂盒检测各组小鼠肝E. m组织中、近穿刺部位或近E. m肝组织和远处肝组织Caspase-3的含量,采用免疫组织化学法检测泡球蚴囊壁周围Ⅳ型胶原表达含量。结果:C、D、E、F、G组小鼠肝脏泡状棘球蚴感染率依次为72.4%、70.0%、71.4%、72.0%、70.8%,此5组小鼠肝脏E. m感染率无差异(P>0.05)。囊湿重:C、D、E、F组的肝脏E. m组织的质量在组间比较中均无差异(P>0.05),G组与C、D、E、F组相比较明显降低(P<0.05)。减蚴率:G组与D、E、F组相比较明显增高(P<0.05)。TUNEL法检测各组远处肝细胞的AI均无差异(P>0.05);所有接种肝E. m组中近E. m肝细胞比远处肝细胞的凋亡指数相比较明显增高(P<0.05);G组近E. m肝细胞AI高于B组,低于C、D、E、F组,均有显著性差异(P<0.05);C、D、E、F组中E.m组织周围炎细胞AI无差异(P>0.05),G组分别与上述各组相比较明显降低(P<0.05)。小鼠血清MMP-2含量:C、D、E组间比较均无差异(P>0.05), C、D、E三组分别与A、B、F、G四组相比较明显增高(P<0.05),F组与C、D、E、G组相比较明显降低(P<0.05),G与C、D、E、F相比较明显降低(P<0.05)。小鼠血清TIMP-2含量:A、B、C、D、E、F、G七组组间比较均无差异(P>0.05),但C、D、E组较A、B组增高。小鼠血清MMP-2/TIMP-2比值:G与A、B、C、D、E、F组相比较明显降低(P<0.05)。各组小鼠远处肝组织中Caspase-3含量均无差异(P>0.05),C、D、E、F、G组近E.m处肝组织caspase-3含量与B组近穿刺部位肝组织Caspase-3含量相比较明显增高(P<0.05),C、D、E组近E. m肝组织Caspase-3含量与自身远处肝组织的Caspase-3含量相比明显增高(P<0.05),F、G组近E. m肝组织的Caspase-3含量较自身远处肝组织Caspase-3含增高,但无差异(P>0.05),C、D、E组近E. m肝组织Caspase-3含量相比较无差异(P>0.05),F、G组近E. m肝组织Caspase-3含量分别与C、D、E组相比较明显减低(P<0.05), G组E. m内Caspase-3含量分别与C、D、E、F组相比较明显增高(P<0.05)。小鼠泡球蚴囊壁中Ⅳ型胶原表达含量:G组与C组、D组、E组、F组相比较明显增高(P<0.05)。结论:MMP-2在小鼠肝泡状棘球蚴病中呈高表达,泡球蚴在宿主体内生长过程中可以促进宿主周围组织分泌MMP-2,利用MMP-2siRNA抑制小鼠体内MMP-2的表达,抑制了肝泡状棘球蚴的浸润性生长,因此,MMP-2在泡状棘球蚴宿主肝内浸润性生长过程中起到重要作用。1.抑制宿主体内MMP-2的表达,抑制了肝泡球蚴周围基质的降解,阻碍了肝泡球蚴的浸润性生长。2.降低MMP-2/TIMP-2的比值,能抑制肝泡状棘球蚴的浸润性生长。3.抑制宿主体内MMP-2的表达,抑制了泡球蚴周围肝细胞及炎细胞的凋亡,可能在抑制肝泡状棘球蚴浸润性生长起重要作用。4. MMP-2可能是靶向治肝泡状棘球蚴病的新靶点。