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本文在对多年生黑麦草(Lolium perenne)种子进行真菌分离鉴定的基础上,深入研究不同接种方法对种子发芽和种苗活力的影响,探讨种带真菌影响种子质量的机理,并初步筛选出适宜多年生黑麦草种子种带真菌的消毒方法,获得如下方面的结果: 1.采用PDA和湿纸法检测国内外20个包括草坪型和牧草型在内的多年生黑麦草品种种子上的真菌区系,发现未经消毒的处理共分离真菌36个属52个种,消毒处理分离出真菌20个属33个种。表面消毒处理可显著降低真菌种类及其分离频率,种子带菌率则因品种不同而异。 2.采用种子解剖法检测分析证实,多数种带真菌主要存在于胚乳,其次为稃壳,甚少存在于胚中;细极链格孢(Alternaria tenuissima)均存在于消毒和未经消毒种子上且在稃和胚乳上出现,因而可确认其为多年生黑麦草种子的寄藏真菌。 3.采用纸上发芽法和纸卷法测定种带真菌孢子悬浮液对道森品种种子发芽率和活力指数的影响,进行菌株筛选。结果与对照相比,枝顶孢显著提高种子的发芽率(P<0.05),活力指数略高于对照,但差异不明显(P>0.05);枝孢、细交链孢和细极交链孢大部分菌株等13个种的真菌发芽率和活力指数与对照差异不显著(P>0.05);其他真菌则明显抑制种子发芽与种苗生长(P<0.05)。德比、爱瑞思和爱森特品种接种18种对发芽和活力产生明显不利影响的真菌孢子悬浮液后,发芽率和发芽势降低,达到50%发芽率的时间推迟,种苗幼芽和幼根的生长受抑,种苗的活力指数降低,种苗的芽干重减少(P<0.05)。其中尤以燕麦镰刀菌(Fusarium avenaceum)、半裸镰刀菌(F.semitectum)、黄色镰刀菌(F.culmorum)、双隔软孺孢(Marielliottia biseptata)、根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)和粉红单端孢(Trichothecium roseum)对种子发芽和生长的不利影响最为显著。采用真菌培养液处理时也得出类似结论。 4.采用孢子悬浮液接种法对多年生黑麦草种子接种24h,通过测定重要的生理生化指标,揭示种带真菌影响种子质量的机理。与对照相比,接种种子的相对电导率增加,呼吸速率增加,酸性磷酸酯酶和脱氢酶活性降低,总糖、还原糖含量下降,可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸和丙二醛含量增加,α-淀粉酶活性提高,SOD和PAL活性下降,种苗叶绿素含量降低。随着接种时间的延长,不同真菌对种子呼吸速率、可溶性糖、可溶性蛋白、游离氨基酸、α-淀粉酶、SOD和PAL活性的影响出现不同的消长现象。 5.采用热水处理对多年生黑麦草种子种带真菌进行消毒处理。初步认为45℃条件下浸种20min可在不影响发芽率的情况下,有效减少种子带菌率和真菌分离率,降低死种率。 6.采用杀菌剂处理对多年生黑麦草发芽和生长产生不利影响的根腐离孺孢、燕麦镰刀菌、双隔软蠕孢和粉红单端孢等真菌,结果不同浓度的供试杀菌剂均有效抑制真菌菌丝生长,且经过处理时间和浓度的筛选,认为在45min下凯润0.2mg/ml、翠贝0.3mg/ml和F518 0.2mg/ml处理均有效促进接种各供试真菌的种子的发芽;对于杀菌剂品润来说,1mg/ml最有效提高接种根腐离孺孢的种子的发芽率,降低死种率;0.1mg/ml有效抑制粉红单端孢对种子发芽的不利影响;0.2mg/ml最有效抑制燕麦镰刀菌和双隔软蠕孢。