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目的:本研究旨在通过高通量测序,检测不同胃泌素表达水平的结直肠癌患者中胃泌素相关的circ RNA_0017065在结直肠癌的发生发展中发挥的生物学作用,以及其调控结直肠癌进展的具体分子机制。方法:检测在我院接受手术治疗的40例结直肠癌患者标本中胃泌素的表达水平,并从中选取胃泌素高表达和胃泌素低表达患者的肿瘤组织及其对应的正常组织各3对。通过高通量测序,分别检测胃泌素高表达患者的肿瘤组织和其相对应的正常组织之间差异的环状RNAs表达水平(第1组),以及胃泌素低表达患者的肿瘤组织和胃泌素高表达患者的肿瘤组织间差异的circ RNAs表达水平(第2组)。并将两组测序结果取交集,得到在两组数据中皆差异表达的环状RNAs图谱(其中在两组数据中都过表达的circ RNAs有3个)。我们再次检测过表达的3个circ RNAs在40对样本组织和细胞中的表达水平,检测结果与测序数据高度一致。根据检测结果,我们从中挑选了表达差异最显著的circ RNA_0017065作为我们的目的基因,进行下一步功能实验。在分别敲除和过表达该基因后,通过体外和体内功能实验研究该基因在结直肠发生发展中的生物学功能。随后,通过数据库和基因芯片筛选下游预测靶基因,进一步探索其潜在的下游分子机制。本次实验使用Graph Pad Prism8.0(Graph Pad Software Inc.,CA,USA)进行统计分析。所有组间差异比较使用t检验和单因素方差分析,组间相关性采用Pearson相关分析。所有统计学数据以均数±标准差(SD)表示,其中P<0.05为据有统计学意义。P<0.05用*表示,P<0.01用**表示,P<0.001用***表示,P<0.0001用****表示。结果:在本次研究中,我们通过高通量测序发现,不同胃泌素表达水平的结直肠癌患者肿瘤组织中的circ RNAs的表达谱是具有显著差异的。并且胃泌素相关的circ RNA_0017065在结直肠癌组织中及结直肠癌细胞系中表达显著升高。功能实验结果表明,在敲除circ RNA_0017065后,结直肠癌细胞的增殖能力和迁移能力明显降低,细胞凋亡率显著上升;而在circ RNA_0017065过表达后,肿瘤细胞的增殖能力和迁移能力明显增强,细胞凋亡则显著减少。后期我们通过生物信息学分析技术,以及目前使用较广泛的预测网站Target Scan、mi Randa等对circ RNA_0017065的潜在分子靶点进行预测,结果显示共有5个mi RNA在多个数据库中均被预测,后期经筛查后确定mi R-3174为其下游的靶基因,并且我们通过大量实验证实circ RNA_0017065直接调控mi R-3174的表达水平。并且两者之间存在显著负相关。进一步机制研究表明,我们发现circ RNA_0017065可作为mi R-3174的海绵,并可通过mi R-3174/RBFOX2通路促进结直肠癌的侵袭转移。结论:1、不同胃泌素表达水平的结直肠癌患者的circ RNAs的表达水平存在显著差异。2、其中胃泌素相关的circ RNA_0017065在结直肠癌患者及结直肠癌细胞中的表达水平显著升高,并且circ RNA_0017065可以通过mi R-3174/RBFOX2轴调控结直肠癌的增殖和转移。3、胃泌素相关的circ RNA_0017065在结直肠癌的发生发展中发挥着关键作用,并有望成为治疗结直肠癌转移的潜在分子靶点,以及结直肠癌早期诊断的生物学标记物。