水稻条纹病毒p2蛋白与本氏烟cajal body的互作研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:datou19881020
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水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)是引发水稻条纹叶枯病的重要病害,造成水稻产量严重减收,甚至颗粒是颗粒无收,因此被称为水稻上的“癌症”。RSV是纤细病毒属的代表种,其致病机制及其编码的蛋白功能是研究热点,p2是其中一个重要的蛋白,它能与本氏烟的纤维蛋白(fibrillan2,NbFib2)互作并影响RSV的系统侵染,NbFib2特异定位在核仁和柯浩体上。本论文围绕p2是核质穿梭蛋白以及RSV可以侵染本氏烟的特点,研究p2与本氏烟柯浩体蛋白(Nbcoilin)的互作关系并初探其在病毒侵染中的作用,为进一步揭示p2及Nbcoilin的功能奠定良好基础。本论文获得以下结果:
  一、本氏烟柯浩体蛋白(Nbcoilin)全长基因的首次获得与确认。该部分通过将拟南芥柯浩体蛋白(Atcoilin)序列在本氏烟数据库中进行比对,确定Nbcoilin对应的靶基因,设计引物进行扩增,并进一步利用5-race和3-race获得Nbcoilin全长,为3,017bp,CDS为2,409bp,编码802个氨基酸。在线蛋白的功能域分析软件显示该蛋白具有coilin的3个典型功能域及“tudor”结构,该蛋白与其他植物coilin的同源性高于50%,系统发育树显示该蛋白归属植物coilin分支;亚细胞定位显示该蛋白能与Atcoilin发生共定位,综上所述,可确定该蛋白为coilin的同源蛋白。
  二、p2与Nbcoilin的互作研究。亚细胞共定位和双荧光互补实验显示p2与Nbcoilin存在互作关系。病毒诱导基因沉默技术对Nbcoilin基因进行沉默,RSV接种该沉默植株,仍发病并伴有明显症状,RT-PCR和Western杂交实验在发病叶片中均能检测出RSV,说明Nbcoilin被沉默后,并不影响RSV的侵染,推测Nbcoilin可能是p2穿梭核质的协助者,为进一步研究Nbcoilin与p2的互作关系提供了进一步思路。
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