马慢病毒受体1(Equine Lentivirus Receptor-1,ELR1)被认为是马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia Virus, EIAV)的唯一受体。当前研究发现其mRNA序列存在三种选择性剪接形式,即插入型、缺失型和膜结合型。插入型选择性剪接体(INR)mRNA是在已公布的序列的786-787位之间存在153bp的插入片段。INR的cDNA在真核表达系统中,表达出38ku的可溶型ELR1受体蛋白(sELR1),该可溶型受体可以明显抑制EIAV感染表达膜结合型ELR1的细胞系。本研究旨在利用原核表达系统,高效表达可溶型受体sELR1。首先利用原核表达载体pGEX-6p-1和pET-30a的相同酶切位点BamH I、Not I,分别构建了表达INR的重组质粒pGEX-INR和pET-30a-INR。然后在经过酶切鉴定、菌液PCR鉴定以及核苷酸序列测定等方法,证明INR正确插入到原核表达载体pGEX-6p-1和pET-30a中,重组质粒pGEX-INR和pET-30a-INR构建成功。最后将构建正确的重组质粒转化到表达菌种BL21(DE3)中,通过改变质粒转化菌的培养时间,从2h-12h不等;改变诱导剂浓度,设置IPTG的终浓度分别为0.2 mmol/L,0.4 mmol/L,0.6 mmol/L,0.8 mmol/L,1.0mmol/L,这2种载体均可较高水平地表达重组sELR1。且重组载体pGEX-INR表达的sELR1在培养时间和IPTG浓度不同的条件下表达量没有较明显的变化。此外,通过改变培养温度28℃和37℃,在含有重组质粒pGEX-INR和pET-30a-INR的菌液中添加1%、3%的山梨醇和葡萄糖,达到使载体pET-30a-INR表达的sELR1在IPTG终浓度0.6mmol/L,培养10h,28℃,添加1%的山梨醇的条件下,以部分可溶蛋白形式存在。pGEX-INR和pET-30a-INR所表达的蛋白sELR1经Western Blot检测鉴定表达正确,大小分别为47Ku,36Ku,与预期结果一致。本研究为进一步制备ELR1蛋白多抗血清以及具有生物活性的ELR1,从受体角度阐明EIAV减毒活疫苗的免疫保护机制奠定了基础。