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胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae, APP)是引起猪传染性胸膜肺炎疾病的病原菌,在世界范围内广泛流行,并且是严重危害养猪业的传染病中重要的传染病之一。2009年,Auger等进行APP体外黏附猪肺上皮细胞实验时,发现一个新基因上调表达,与流感嗜血杆菌自转运黏附素Hsf具有较高的同源性；在许多细菌中的自转运黏附素具有一定的免疫保护作用,其中以自转运黏附素成功开发出商品化的高效疫苗,最典型的是百日咳杆菌的pertactin (PRN)作为一种疫苗组分添加,pertactin是疫苗产生抗体水平提高、减低百日咳感染的重要因素。因为APP中同样具有三聚体自转运黏附素,所以尝试利用百日咳的疫苗案例进行研究。APP具有众多血清型,其致病力和免疫原性各不相同,主要血清型间无免疫交义保护,是制约APP致病机理和疫苗研究的瓶颈,严重影响了APP的诊断、检疫和预防。为寻找有效的诊断、检疫和预防的新方法,本研究选择APP血清2、4、6、8、9、10型菌株为研究对象,以GenBank报道的APP血清5b型自转运黏附素基因(CP000569.1,500018-510061bp)设计引物,通过PCR的方法寻找该基因,经生物信息学分析并预测各血清型三聚体自转运黏附素功能区,寻找到血清8型功能区完整,并将其功能区命名为adh基因进行克隆与序列分析,对该adh基因进行原核表达,同时进行昆明小鼠抗APP感染进行免疫保护性测定,验证adh重组融合蛋白免疫保护性,并用凝血酶切除该重组融合蛋白的GST标签,纯化Adh蛋白,并检测Adh蛋白是否对猪肺上皮细胞具有黏附活性。结果表明,血清2、4、6、8、9、10型的自转运黏附素的基因具有较大差异,发现血清8型与血清5b型自转运黏附素氨基酸序列同源性达到92%,氨基酸推导序列同源达到82%：并成功获得融合蛋白GST-8Adh,实验表明该蛋白及其抗体具有抑制APP对猪肺上皮细胞的黏附作用,并且对血清4、8型保护力达到9/10,对其他血清型保护不明显,但也有一定的保护能力。本研究证明了APP中三聚体自转运黏附素可以作为基因工程疫苗的候选靶位,并且为今后APP不同血清型新型多价疫苗研究、致病机理研究的建立提供必要的基础。