2型糖尿病大鼠骨折愈合障碍与骨组织中TNF-α表达变化的研究

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目的:建立2型糖尿病大鼠动物模型,并探讨2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子α在骨痂中表达的变化与糖尿病骨折愈合障碍的关系。方法:30只健康雄性8周龄SD大鼠,随机分为对照组15只,喂以普通饲料;实验组15只,喂以高糖高脂饲料。8周后,实验组一次性腹腔注射链脲佐菌素(30mg/kg),对照组腹腔注射等量枸橼酸盐缓冲液。2周后,将空腹血糖大于16.7mmol/L者纳入实验组继续实验,实验组和对照组都建立大鼠左胫骨牵引成骨的实验动物模型,第二天起开始胫骨延长,延长持续14天。牵引速率为0.15mm/次,2次/天,共0.3mm/天,将实验第8、10周及结束时收集的血清标本分别检测血糖、甘油三酯、总胆固醇、胰岛素。牵引术后的第2,8,15天分组处死动物,采集左胫骨标本,分别作组织学检查(HE染色及免疫组织化学)、RT-PCR检查,每个时间点10只大鼠(对照和实验组各5只)。结果:8周后,实验组大鼠血清甘油三酯、总胆固醇和胰岛素较对照组升高(P<0.01),空腹血糖无明显差异(P>0.05)。10周后及实验结束时,实验组大鼠空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇较对照组升高(P<0.01),血胰岛素无明显差异(P>0.05)。免疫组织化学及RT-PCR结果显示实验组较对照组骨组织中TNF-α的表达增高(P<0.01),且实验组2型糖尿病骨折愈合障碍表现为:对照组X线摄片显示骨折断端之间牵引骨痂形成明显减少;骨痂组织学检查表现为微骨柱排列紊乱,初始基质前沿浅染。结论:高糖高脂饲养联合小剂量STZ一次性腹腔注射建立的糖尿病大鼠模型具有高血糖、高甘油三酯、高胆固醇、胰岛素不低等人类2型糖尿病代谢紊乱特点。2型糖尿病大鼠骨折牵引骨痂生成障碍,骨组织中TNF-α的表达的增高,可能是导致2型糖尿病骨折愈合障碍的原因之一。
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