多发性硬化症(Multiple Sclerosis,MS)是一种慢性自身免疫疾病,其特征为炎性脱髓鞘以及进一步的脊髓损伤。MS因其具有高发病率、病程长以及青壮年易患而备受重视,目前尚无满意的治疗方式,因此,探索新型药物对治疗或是改善MS具有重要的意义。实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis,EAE)是MS经典的动物模型,主要用于自身免疫炎症相关的基础研究。树突状细胞(Dendrite cell,DC)作为专职的抗原提呈细胞,在适应性免疫应答的初始阶段起到至关重要的作用。白花丹素(PL)是一种中药复合物,具有免疫调节活性,从而其可能成为一种新的免疫相关疾病的候选药物,同时白花丹素对DC的作用以及机制尙不清楚。研究目的:体外实验探讨白花丹素对人CD14阳性单核细胞来源的DC的分化、成熟、抗原摄取和DC介导的T细胞增殖的影响,以及其对DC炎症因子表达的调节作用;体内实验进一步探究了白花丹素对EAE作用和细胞机制。实验内容和方法:体外研究用磁珠分选人外周血中CD14阳性单核细胞,随后加入细胞因子诱导其向DC分化,并用脂多糖刺激其成熟,流式细胞术检测白花丹素处理后,未成熟DC(i DC)以及成熟DC(m DC)表面标记的表达情况。同时,白花丹素预处理后,用流式细胞术检测FITC-dextran的摄取来探究i DC抗原摄取能力;用混合淋巴细胞反应方法检测m DC刺激T细胞增殖的能力,并用实时定量PCR检测DC中T细胞极化以及炎症相关细胞因子的表达水平。体内研究应用注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein,MOG)诱导小鼠EAE模型,应用白花丹素腹腔注射治疗,对小鼠进行临床评分,处死后对其脊髓进行组化检测,包括H&E染色以及Luxol fast blue染色。应用流式细胞术检测白花丹素治疗以及未治疗的EAE小鼠脾脏中DC细胞的表达情况。实验结果:体外实验中,流式细胞术结果提示白花丹素可以抑制人单核细胞来源的DC细胞的分化、成熟及其功能,包括降低i DC和m DC表面标记CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达,i DC抗原摄取以及m DC的抗原呈递能力;同时,白花丹素也能抑制m DC细胞中Th1,Th17细胞极化的相关细胞因子的表达;此外,在体内实验中,白花丹素对DC细胞均具有抑制作用;进一步的,本实验研究发现白花丹素对小鼠DC细胞系DC2.4同样具有抑制作用,明显缓解小鼠EAE的发病以及临床症状。结论:白花丹素可以抑制DC细胞的分化,成熟以及功能,提示白花丹素可能具有免疫抑制和抗炎活性,因此白花丹素可能对于DC相关的自身免疫和炎性疾病具有潜在的治疗作用。