柠檬黄酮在提取、纯化及其在烟草中的应用

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本论文以柠檬作为研究对象,对柠檬果肉、柠檬皮中所含的黄酮类化合物进行了提取、纯化工艺研究;对提取物中黄酮的含量进行了检测;对提取物粗品和初步纯化后样品的抗氧化性能进行了研究;首次将柠檬皮黄酮提取物添加到卷烟中,研究了柠檬皮黄酮在卷烟中的转移率及对卷烟吸味品质的改善效果。主要研究结果如下:1、对柠檬果肉黄酮提取工艺进行了优化,考察了超声波辅助、微波辅助两种提取工艺方法。在单因素实验的基础上,用正交法优化了提取工艺参数。超声波辅助法提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%,料液比1:40,超声时间40 min。最佳提取条件下,提取得率为2.3 mg/g;微波辅助法提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度60%,微波功率200 W,微波时间20 min,料液比1:20。最佳提取条件下提取得率为2.2 mg/g。2、对柠檬皮黄酮提取工艺进行了优化,考察了超声波辅助、微波辅助两种提取工艺方法。在单因素实验的基础上,用正交法优化了提取工艺参数。超声波辅助法提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度60%,料液比1:60,超声时间25 mmin。最佳提取条件下,提取得率为24.2 mg/g。微波辅助法提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度80%,微波功率200 W,微波时间15 mmin,料液比1:50。最佳提取条件下,提取得率为38.4 mg/g。3、确定了大孔树脂法分离、纯化柠檬皮黄酮的最佳工艺条件。通过静态吸附与解吸实验选定大孔吸附树脂HPD-100为最佳树脂;静态吸附和解吸实验最佳工艺条件为:上样液浓度15.00 mg/mL,吸附时间8.0 h,溶液pH为6.00,洗脱液为浓度80%的乙醇水溶液,解吸时间10.0 h;动态吸附和解吸实验最佳工艺条件为:上样量100.00 mL,上样速率4 BV/h,水洗体积2 BV(157.00 mL),醇洗体积3 BV(235.50 mL),洗脱速率2 BV/h。4、用紫外分光光度法分析了柠檬皮黄酮提取物中总黄酮的含量,纯化前粗产品黄酮含量为13.3mg/g,纯化后精产品黄酮含量提高到211.7 mg/g。用高效液相色谱(HPLC)法分析了经过大孔树脂纯化、溶剂萃取后柠檬皮黄酮提取物的主要成分,确定了HPLC法测定柠檬皮黄酮提取物的色谱条件为:柱温30℃,流动相为0.1%磷酸水溶液:乙腈=20:80,流速1.0mL/min,进样量20 μ L,检测波长283 nm。将所得结果与标准品谱图对比,得出:纯化后的柠檬皮黄酮主要成分有地奥司明、圣草次苷和橙皮苷,其含量分别为3.50%、35.45%和13.27%。5、对柠檬皮黄酮的清除自由基、总抗氧化性能进行了研究,结果表明:随着提取物溶液中黄酮浓度的增加,样品清除DPPH自由基的能力、总抗氧化能力随之增强;柠檬皮黄酮粗产品、纯化后精产品清除DPPH自由基的能力、总抗氧化能力比BHT强,但比Vc的弱;且纯化后黄酮精产品的抗氧化能力比纯化前粗产品强。6、对柠檬皮黄酮提取物在卷烟中的转移率情况进行了研究。结果表明:其转移率规律基本同加标样品芦丁一致,卷烟A、B、C的烟丝转移率分别为8.77%、7.26%、7.82%;滤嘴截留率4.66%、5.02%、5.15%:主流烟气转移率5.30%、6.19%、5.67%;滤嘴迁移率未检出。7、对柠檬皮黄酮提取物改善卷烟吸味品质的作用进行了研究。结果表明:将柠檬皮黄酮提取物加入卷烟后,使烟香飘扬,轻微润,生津,青香增加,余味酸后回甜,枯焦气下降,劲头集中。具有明显的改善卷烟吸味品质的作用,可作为植物型卷烟添加剂的有效的备选原料。
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