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目的:本课题以脂多糖诱导BV-2细胞炎症模型为对象,对天麻酚性成分B、C、D、H减轻脑缺血后神经炎症的作用及机制进行研究。方法:1.天麻酚性成分对M1/M2型小胶质细胞特异性细胞因子释放和特异性蛋白表达的影响采用LPS刺激BV-2细胞建立炎症模型;分别采用ELISA试剂盒、流式细胞术和Western Blot法等检测天麻酚性成分B、C、D、H对M1型小胶质细胞特异性细胞因子NO、TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE2释放的影响,对M2型小胶质细胞特异性细胞因子IL-10和TGF-β释放的影响,对M1型小胶质细胞特异性蛋白CD16/32和iNOS表达的影响,对M2型小胶质细胞特异性蛋白CD206和Arginase-1表达的影响。2.天麻酚性成分对小胶质细胞活化后MAPK和NF-κB信号通路的影响采用Western Blot法检测四个天麻酚性成分对TLR4介导的MyD88依赖性通路下游MAPK信号通路和NF-κB信号通路的相关蛋白(MyD88、p38 MAPK、p-p38 MAPK、JNK、p-JNK、ERK1/2、p-ERK1/2、NF-κB p65、p-NF-κB p65)的表达,考察这四个成分减轻神经炎症的作用机制。结果:1.天麻酚性成分对M1型小胶质细胞特异性细胞因子释放的影响1μg·mL-1的LPS刺激BV-2细胞24h后使其活化,产生大量M1型特异性细胞因子,米诺环素可显著降低NO、TNF-α、IL-6和PGE2的含量,天麻酚性成分B、C、D、H均可降低NO、TNF-α的含量,对其它炎症因子的作用具有选择性。2.天麻酚性成分对M2型小胶质细胞特异性细胞因子释放的影响天麻酚性成分B、C、D、H、米诺环素和IL-4均可显著升高正常BV-2细胞释放M2型特异性细胞因子IL-10和TGF-β的含量;LPS诱导BV-2细胞活化后,不同成分对M2型细胞因子释放的影响具有选择性。3.天麻酚性成分对M1/M2型小胶质细胞特异性蛋白表达的影响LPS诱导BV-2细胞活化后,膜蛋白CD16/32和CD206的表达无明显变化,iNOS蛋白的表达显著升高,天麻酚性成分B、C、D、H、米诺环素和IL-4均可显著下调M1型特异性膜蛋白CD16/32的表达,上调M2型特异性膜蛋白CD206的表达,仅有成分H能降低iNOS蛋白的表达。4.天麻酚性成分对小胶质细胞活化后MAPK和NF-κB信号通路的影响LPS诱导BV-2细胞活化后,p38 MAPK、JNK、NF-κB p65蛋白的磷酸化表达均显著升高,蛋白NF-κB p65的非磷酸化表达降低,蛋白MyD88和ERK1/2的表达均无明显变化;米诺环素能下调蛋白p38MAPK、JNK、NF-κBp65的磷酸化表达;成分B、C、D、H均能下调蛋白JNK和NF-κB p65的磷酸化表达,对其它蛋白表达的影响具有选择性。结论:四个天麻酚性成分具有减轻神经炎症的作用,其机制为抑制BV-2小胶质细胞向促炎的M1型活化,促进其向抗炎的M2型转换,通过调控TLR4介导的MyD88依赖性通路下游的MAPK和NF-κB信号通路发挥减轻脑缺血后神经炎症的作用。具体表现为:四个成分均能减少M1型细胞因子TNF-α的释放,均能促进正常BV-2细胞释放M2型细胞因子IL-10和TGF-β,均能下调M1型蛋白CD16/32的表达和上调M2型蛋白CD206的表达,均能下调蛋白JNK和NF-κB p65的磷酸化表达,对其它细胞因子释放和蛋白表达的影响,不同成分的作用具有选择性。