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目的:研究线粒体酸-5(mitochonic acid-5,MA-5)对LPS损伤小胶质细的保护作用及机制。方法1.MTT法检测小胶质细胞BV-2细胞活性,半胱天冬酶3(caspase-3)活性检测及TUNEL法检测细胞凋亡;2.通过JC1染色法、mPTP开放率及细胞内钙含量检测线粒体膜电位变化;3.使用siRNA沉默Mfn2,蛋白免疫印迹法(Western Blotting)检测Mfn2及凋亡蛋白半胱天冬酶-3(Caspase-3)、半胱天冬酶-9(Caspase-9)表达,并同时检测Caspase-3、Caspase-9活性;应用线粒体溶酶体荧光共定位观察线粒体自噬。4、ATP水平试剂盒检测线粒体ATP水平、免疫荧光检测细胞内ROS以及非氧化型心肌磷脂表达水平;5.通过Transwell检测以及细胞骨架肌动蛋白微丝F-actin免疫染色检测细胞迁移。结果1.MA-5保护小神经胶质细胞BV-2免受LPS诱导的细胞凋亡。与对照组相比,LPS能显着降低细胞活力,Caspase-3活性增加,增加细胞凋亡数量,使用MA-5后,能增加LPS处理后的BV-2细胞的活力,减少凋亡数量,表明MA-5保护小神经胶质细胞BV-2免受LPS诱导的细胞凋亡。2.MA-5抑制LPS诱导的线粒体损伤。MA-5使LPS处理的BV-2细胞线粒体膜电位升高,细胞内钙超载得到缓解,半胱天冬酶9(Caspase-9)及半胱天冬酶3(Caspase-3)活性及表达下降,表明MA-5抑制LPS诱导的线粒体损伤。3.MA-5增强Mfn2相关的线粒体自噬活性。MA-5干预后,LPS处理的BV-2细胞线粒体与溶酶体融合数量增加,Mfn2的表达升高,半胱天冬酶9(Caspase-9)活性增高,用siRNA沉默Mfn2,Mfn2表达下降,线粒体和溶酶体融合数量减少,半胱天冬酶9(Caspase-9)活性降低,表明MA-5增强了线粒体自噬活性,并依赖Mfn2的表达。4.MA-5激活的线粒体自噬增强细胞能量产生。MA-5能增加LPS处理后的BV-2细胞ATP水平,减少ROS的产生,减少心肌磷脂的氧化。siRNA沉默Mfn2后,MA-5的逆转作用消失。5.MA-5增强线粒体自噬促进LPS诱导的炎性损伤后BV-2细胞的迁移。MA-5能增加LPS处理后的BV-2细胞迁移数量,增加F-actin的表达,siRNA沉默Mfn2后,MA-5的逆转作用消失。表明MA-5增强线粒体自噬促进LPS诱导的炎性损伤后BV-2细胞的迁移。结论MA-5激活线粒体自噬能保护LPS损伤小胶质细胞BV-2,其机制可能是通过Mfn2所介导。