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环境内分泌干扰物(Environmental Endocrine Disrupting Chemicals,EDCs)是一类影响生物内源激素正常合成和代谢,进而影响生物内环境稳态、生殖发育等正常生理活动的外源性化学物质,包括类雌激素物质,有机氯农药和重金属等。EDCs广泛存在于水体、大气、土壤等环境中,其中以水环境的含量最高。双酚A(biphenol A,BPA)是我国近海浓度最高的环境内分泌干扰物,具有类雌激素作用,研究表明,BPA对鱼类具有毒性致死作用,并且会影响鱼类的生长和性腺发育。在对我国各地沿海的水样检测中,冬季和夏季所有水样均检出BPA,夏季平均浓度为0.449μg·L-1,冬季平均浓度为0.186μg·L-1,我国南海海水中BPA浓度在冬季可达到1.4μg·L-1,浙江近岸海水中BPA浓度在冬季为0.3~1.0μg·L-1,夏季在0.02~0.4μg·L-1。小黄鱼作为我国重要的经济水产鱼类,在我国近海海域有广泛的分布,小黄鱼雄性性腺发育过程中会经历短暂的雌雄同体阶段,已有研究表明此阶段主要受遗传因素影响,但不排除环境因素也会参与影响。为探明BPA对小黄鱼(Larimichthys polyactis)幼鱼的急性毒性以及半致死浓度和安全浓度,本研究首先在0~5.0 mg·L-1之间设置不同浓度梯度的BPA对孵化后25天的小黄鱼进行浸浴96 h(96小时)的急性毒性实验。统计各时间段小黄鱼的存活率。结果表明,采用液质联用法(High Performance Liquid Chromatography-Mass Spectrometry,HPLC-MS/MS)未检测到实验养殖水体中含有BPA,不同浓度BPA浸浴96 h后,0~2.5 mg·L-1浓度范围内以及无水乙醇对照组的存活率都在96.73%以上,浓度达到3.0 mg·L-1时存活率显著下降到81.25%,浓度达到5.0 mg·L-1时,存活率下降为0。计算得出BPA浸浴96 h小黄鱼的半致死浓度为3.94 mg·L-1,安全浓度为1.08mg·L-1。为探明BPA对小黄鱼的生长和性腺发育的影响,设置0、0.001、0.05和0.5 mg·L-1四个浓度梯度以及对照组对孵化后30天(dph)的小黄鱼进行为期60天的BPA浸浴,浸浴结束后,停药继续饲养至孵化后150天。分析结果表明,不同浓度BPA浸浴30 dat(dat,days after treatment)时,并未对小黄鱼的体长和体重产生显著影响,0.5 mg·L-1浸浴组雌性小黄鱼性腺重显著低于其他浸浴组,0.05和0.5 mg·L-1浸浴组雌性小黄鱼性腺成熟系数显著低于其他浸浴组,各浸浴组雄性性腺重和性腺成熟系数无显著差异;组织学观察结果表明,0.001、0.05和0.5 mg·L-1浸浴组卵巢与对照组相比均无较大影响,0.001 mg·L-1浸浴组精巢出现大量初期卵母细胞成为卵精巢,0.05和0.5 mg·L-1浸浴组精巢则出现精巢皮质增生;对各组性腺中生殖细胞数量统计结果显示,0.5 mg·L-1浸浴组精巢和卵巢中生殖细胞数量显著下降,其他组与对照组相比无显著差异。浸浴后60 dat时,与对照组相比,随浸浴浓度升高,小黄鱼体长和体重呈递减趋势,雌性小黄鱼无显著差异,但雄性小黄鱼生长受到显著抑制,0.05和0.5mg·L-1浸浴组雌性小黄鱼性腺成熟系数显著低于其他组;组织学观察结果表明,0.001、0.05和0.5 mg·L-1浸浴组卵巢与对照组相比卵母细胞出现退化凋亡,且随着浸浴浓度升高,凋亡越严重;0.001 mg·L-1浸浴组精巢卵母细胞完全退化,与对照组相比精巢无明显差异,0.05和0.5 mg·L-1浸浴组精巢结构发育紊乱,精巢皮质增生;0.05和0.5mg·L-1浸浴组卵巢中生殖细胞数量显著低于对照组,0.5 mg·L-1浸浴组精巢生殖细胞数量显著低于对照组。停药继续饲养至150 d,BPA对小黄鱼生长的抑制依然没有恢复。精巢结构发育紊乱和卵巢中卵母细胞退化的表型持续存在。所有BPA浸浴组的卵巢生殖细胞数量均低于对照组,而精巢中只有0.05和0.5 mg·L-1组的生殖细胞数量低于对照组。通过对各表型比例的统计发现,BPA并未引起小黄鱼群体雌性化。本研究得出的结果证明,BPA对小黄鱼具有毒性效应,其毒性属于中毒,长期浸浴会抑制小黄鱼生长,导致小黄鱼卵巢中卵母细胞凋亡,产生卵精巢、精巢皮质增生和精巢结构发育紊乱的表型,使性腺中生殖细胞数量减少,并且这种影响是长期持续的,在停止浸浴后仍然存在。本研究探究了BPA对小黄鱼的毒性作用以及对小黄鱼生长和性腺发育的影响,为接下来研究双酚A对小黄鱼性腺发育的影响提供数据基础,丰富了双酚A对海洋生物毒性作用的研究结果,为研究双酚A对其他生物的毒性作用提供参考,增加了环境因素对小黄鱼生长和性腺发育影响的研究成果,为小黄鱼的性别控制理论提供了基础数据,对保护小黄鱼种群资源,推进小黄鱼人工养殖产业化具有重要意义。