超声引导微波消融诱导裸鼠甲状腺癌细胞凋亡的实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaoyaoyang22
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[目的]1、建立裸鼠皮下移植性甲状腺癌动物模型;2、筛选低能级微波消融诱导裸鼠皮下甲状腺癌细胞凋亡的有效参数;3、探讨低能级微波消融甲状腺肿瘤的安全性及有效性。[方法]200只裸鼠通过肿瘤组织块混悬液注射法建立裸鼠皮下移植性甲状腺癌模型,选择肿瘤大小相近的170只模型裸鼠随机分为33个治疗组及1个对照组,每组5只裸鼠。治疗组分别对微波消融时间及消融功率进行分组:165只治疗组裸鼠按照消融时间分为2min、3min、4min三组;各时间组内按照消融功率分为5W、6W、7W、8W、9W、10W、11W、12W、13W、14W、15W 共 11 组进行超声引导下微波消融治疗。微波消融前后,实验裸鼠分别进行六氟化硫微泡超声造影,对比评价裸鼠皮下甲状腺肿瘤消融效果。消融结束24小时后取肿瘤行HE染色观察肿瘤组织病理改变;Tunel染色及流式细胞仪凋亡检测法检测肿瘤组织凋亡坏死情况。[结果]1、成功建立裸鼠皮下甲状腺癌模型。2、超声表现:二维超声示肿瘤截面呈椭圆形,为不均质低回声团块,内可探及点状强回声及分隔,CDFI示肿瘤边缘及内部可见少许星点状血流信号。术前超声造影:肿瘤内部造影剂填充完好;术后超声造影:对照组肿瘤内部造影剂填充完好,治疗组随着消融功率及时间的增加,肿瘤内部造影剂缺损区域不断扩大。当微波消融参数在2min时间组内达13W、3min时间组内达8W、4min时间组内达8W时,肿瘤内部无造影剂充填;继续增加各时间组内消融功率肿瘤内部仍为无造影剂充填的缺损区。3、HE染色:微波消融可诱导肿瘤组织发生凋亡与坏死,随着微波消融功率及消融时间的增加,肿瘤组织中凝固性坏死区域扩大。4、Tunel染色结果:2min13W、3min8W、4min8W分别为各时间组最低微波消融功率,继续增加各时间组内微波消融功率,肿瘤细胞凋亡指数变化无统计学差异(P>0.05)。5、流式细胞仪凋亡检测结果:2min12W、3min8W、4min7W为各时间组内最低微波消融功率,继续增加微波消融功率,肿瘤细胞的存活率及凋亡率的变化无统计学差异(P>0.05)。[结论]与肿瘤细胞悬液注射法相比,采用肿瘤组织块混悬液注射法建立裸鼠皮下甲状腺癌模型,成功率更高、建模周期更短,成本更低。在裸鼠接受肿瘤组织块混悬液注射后的19天左右,肿瘤大小合适、内部无液化坏死,适合进行各项实验操作。超声引导下低能级微波消融治疗裸鼠皮下甲状腺癌具有创伤小、疗效好、安全性高的特点。高功率、长时间的微波消融可引起周围组织损伤,消融功率为8W,消融时间为3min的条件下可达到完全灭活肿瘤组织的目的,同时减少相关风险,是微波消融治疗裸鼠甲状腺癌模型最低参数设置。
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