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本研究以青藏高原优良牧草-垂穗披碱草(Elymus nutans)为试验材料,评价其在不同温度(5℃、15℃和25℃)下调制的青贮饲料的发酵品质；并对不同温度(5℃、15℃、25℃)和发酵阶段(2、4、6、8、12、14、30、60d)垂穗披碱草青贮饲料中的乳酸菌进行分离、纯化及鉴定,探究青藏高原垂穗披碱草青贮饲料中乳酸菌的多样性,并筛选在低温条件下(10℃和15℃)生长较好的优良菌株；同时,将筛选出的乳酸菌作为添加剂加入垂穗披碱草进行青贮,并以商品化乳酸菌制剂为对照,研究所筛选的优良乳酸菌在低温(15℃)和常温条件(25℃)下对垂穗披碱草青贮饲料发酵品质的影响。本研究旨在发掘适合青藏高原高寒地区牧草青贮的乳酸菌菌种,为青藏高原特殊环境条件下调制优质青贮饲料提供菌种资源和理论依据。试验结果如下：1.将垂穗披碱草直接进行青贮,在5℃时,青贮60d后pH值微弱下降至6.08,乳酸含量为0.34%,基本无青贮效果；在15℃时,青贮60d后pH值缓慢下降至5.68,乳酸含量达1.44%,青贮饲料发酵程度较低；在25℃时,青贮60d后pH值降为4.27,乳酸含量达6.21%。25℃较5℃和15℃显著降低了pH值(P<0.05),增加了乳酸含量(P<0.05),取得了良好的青贮效果。2.试验从不同温度和发酵阶段的垂穗披碱草青贮饲料中共分离得到108个乳酸菌菌株,经过16S rRNA序列分析并构建系统发育树,发现它们分属于6个属,18个种。6个属分别为乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、乳球菌属(Lactococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)和片球菌属(Pediococcus),其中,明串珠菌属和乳杆菌属为优势属,共占82.4%。18个种分别为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、棒状乳杆菌(Lactobacillus coryniformis)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)、肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesentercides)、乳明串珠菌(Leuconostoc lactis)、柠檬明串珠菌(Leuconostoc citreum)、Leuconostoc garlicum、食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)、绿色魏斯氏菌(Weissella viridescens)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、耐久肠球菌(Enterococcus durans)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)和乳酸乳球菌(Latfococcus lactis),本试验在青藏高原垂穗披碱草青贮饲料中发现的乳酸菌属基本涵盖了前人在常温青贮饲料中发现的所有属,但种数略少。3.通过将不同乳酸菌分别接种至培养基和绿汁发酵液进行培养并筛选,发现清酒乳杆菌LS-53在15℃显著降低了发酵液pH值(P<0.05),戊糖片球菌PP-63在发酵初期生长速度较快,植物乳杆菌LP-21在15℃可使发酵液pH值降至3.9且有最大活菌数。因此,选择此3株菌作为低温发酵优良乳酸菌菌株。4.通过生理生化特性研究发现,在碳源利用方面,分离得到的戊糖片球菌PP-63发酵棉籽糖、乳糖、山梨醇、蜜二糖和蔗糖,清酒乳杆菌LS-53可发酵棉籽糖、苦杏仁苷、鼠李糖、乳糖、山梨醇、木糖、阿拉伯糖、蜜二糖和蔗糖,而同种商品菌均不能利用,表明高原乳酸菌具有更广泛的糖原利用特性。通过不同温度下菌株的生长能力测定发现,在50℃时,分离得到的清酒乳杆菌LS-53只有有微弱生长,而商品菌生长较好。研究结果揭示,与低海拔分离得到的普通商品菌株相比,高原乳酸菌生理生化特性呈现出一定的特异性。5.将筛选得到的3株低温生长优良菌株进行青藏高原垂穗披碱草青贮发酵试验,青贮50d后,与对照的商品菌相比,在15℃时,清酒乳杆菌LS-53显著降低了青贮饲料pH值、丙酸含量和氨态氮/全氮值(P<0.05),且能够保存更多的水溶性碳水化合物和粗蛋白；植物乳杆菌LP-21和戊糖片球菌PP-63作为复合添加剂显著提高了青贮饲料乳酸含量(P<0.05),显著降低了氨态氮／全氮值和中性洗涤纤维含量(P<0.05),能够保存更多的粗蛋白。在25℃时,此三株菌均无明显优势。上述结果表明,此3株菌在低温条件下可有效提高青藏高原垂穗披碱草青贮饲料的发酵品质。