健脾补肾方对Lewis肺癌移植瘤小鼠K-ras和突变型P53蛋白表达的影响

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目的:本实验通过建立Lewis肺癌移植瘤的小鼠模型,检测小鼠肿瘤组织中K-ras和突变型p53蛋白的表达情况,分析并探健脾补肾方对Lewis肺癌转移瘤小鼠癌中K-ras和p53基因表达的影响。并观察健脾补肾方在体内实验中对荷瘤小鼠一般情况、抑瘤率、胸腺/脾脏指数等指标的影响,从而为健脾补肾方在临床上进一步应用和推广提供理论依据。方法:先从80只健康C57BL/6小鼠中随机抽取10只进行预实验造模,并随机抽取15只作为空白对照组(A组),待预实验成功后再将剩余小鼠共同造模。随机选取造模成功的小鼠48只,分为荷瘤对照组(B组),顺铂组(C组),健脾补肾方组(D组),健脾补肾方+顺铂组(E组)4组,加空白对照组(A组),共5组进行实验:A组与B组:给予生理盐水0.2ml灌胃,每天1次,共14天;同时隔天腹腔注射生理盐水0.2ml,共3次(第1、3、5天)。C组:用备好的中药煎剂0.2ml灌胃,每天1次,共14天;同时隔天腹腔注射生理盐水0.2ml,共3次(第1、3、5天)。D组:给予生理盐水0.2ml灌胃,每天1次,共14天;同时隔天腹腔注射备好顺铂溶液0.2ml(浓度),共3次(第1、3、5天)。E组:用备好的中药煎剂0.2ml灌胃,每天1次,共14天;同时隔天腹腔注射备好顺铂溶液0.2ml,共3次(第1、3、5天)。每天观察并测量小鼠一般状况、体重、毛色及死亡等情况并记录,第15天将小鼠统一颈椎脱臼处死后,取小鼠右腋部皮下接种瘤体、胸腺、脾脏组织。分别对瘤重、脾脏、胸腺进行称重,计算抑瘤率、免疫器官(胸腺、脾脏)指数,应用SP免疫组织化学检测K-ras、p53蛋白表达,最后应用SPSS17.0软件计算阳性率。结果:1、健脾补肾方组、顺铂组及健脾补肾方组+顺铂组小鼠瘤体重量小于荷瘤对照组(P﹤0.01);2、健脾补肾方组及健脾补肾方+顺铂组小鼠的免疫脏器指数高于顺铂组(P﹤0.05);3、健脾补肾方组、顺铂组及健脾补肾方+顺铂组小鼠癌组织中K-ras表达阳性率低于荷瘤对照组(P﹤0.01);4、健脾补肾方组、顺铂组及健脾补肾方+顺铂组小鼠癌组织中突变型P53阳性表达率低于荷瘤对照组(P﹤0.01)。结论:健脾补肾方能有效抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠移植瘤的增殖,提高小鼠免疫功能,其机制可能与下调K-ras的基因表达和抑制P53基因突变有关。
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