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目的：构建人组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2，并将其转入人急性单核细胞白血病细胞系(SHI-1)细胞，观察SHI-1细胞中TFPI-2基因的表达，并研究TFPI-2基因对SHI-1细胞周期的影响.方法：通过基因化学合成的方式得到TFPI-2的CDNA，将获得的TFPI-2基因和线性载体片段进行连接，并插入载体PEGFP-N1多克隆位点处,PEGFP-N1-TFPI-2真核载体的构建成功，经酶切和核苷酸测序鉴定,证实TFPI-2基因插入载体中。利用脂质体lipofectamine2000介导的基因转移技术将真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞,并通过荧光显微镜观察细胞转染的情况。成功转染PEGFP-N1-TFPI-2载体的细胞命名为SHI-1-TFPI-2(实验组)。转染空载体pEGFP-N1的细胞和未转染细胞分别设为对照组1和对照组2,分别命名为(SHI-1-V和SHI-1-P。）通过RT-PCR检测TFPI-2转染前后每组细胞中TFPI-2mRNA表达水平。流式细胞仪检测实验组和对照组细胞的细胞周期情况。结果：1:成功构建了人TFPI-2基因真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2。2:将载体PEGFP-N1-TFPI-2转染SHI-1细胞，12h后在荧光显微镜下可见荧光细胞，表明载体PEGFP-N1-TFPI-2成功转入SHI-1细胞，24h后，48h后可见荧光细胞数目增多。3:RT-PCR结果显示:TFPI-2基因与内参β-actin条带灰度比值实验组高于对照组。灰度比值分别为： SHI-1-V组:0.51+0.04.SHI-1-P组:0.52+0.03.SHI-1-TFPI-2:0.87+0.08.SHI-1-TFPI-2组与SHI-1-V相比（P<0.05）有统计学意义.SHI-1-TFPI-2组与SHI-1-P相比（P<0.05）有统计学意义。4:流式细胞仪检测细胞周期表明，转染24h后，SHI-1-TFPI-2细胞组和SHI-1-V和SHI-1-P组各期DNA含量接近，P>0.05，无统计学意义。48h后，SHI-1-TFPI-2细胞S期DNA含量较SHI-1-V和SHI-1-P组明显下降（P<0.05）结论：真核表达载体PEGFP-N1-TFPI-2中TFPI-2基因能抑制SHI-1细胞DNA的合成，使细胞增殖减慢，改变细胞周期分布，发生S期阻滞。