镇海棘螈(Echinotriton chinhaiensis)分布在浙江省宁波市,是中国特有的两栖动物,国家二级保护动物,但其野外数量不足400尾,种群极其稀少。它在中国物种红色名录中被收录为极危级,同时也被IUCN列为极危级,表明它在野外灭绝的可能性很高。但目前仅有少数学者对其野生种群进行过繁殖栖息地调查、人工圈养实验。本论文对镇海棘螈分子鉴定、繁殖场选择、早期个体生长发育、早期个体人工繁育进行探究,并成功繁育幼体。通过本研究能够为镇海棘螈就地保护和人工圈养提供基础指导,为其他野生珍稀濒危物种,如高山棘螈(E.axiquadratus)、琉球棘螈(E.andersoni)等有尾类动物的保护提供参考。(1)分子进化研究:提取镇海棘螈DNA,选择线粒体DNA常用靶标CO I基因、12S r RNA基因、16S r RNA基因和D-loop区序列,进行PCR扩增测序并和近缘物种琉球棘螈、文县疣螈及贵州疣螈进行聚类和比较分析。结果表明,本实验测得DNA序列与Gen Bank数据库中镇海棘螈的CO I基因、12S r RNA基因和16S r RNA基因序列完全相同,而D-loop区序列则以测序失败未能进行对比分析。序列相似性和聚类关系表明,本实验测得的CO I序列和Gen Bank数据库镇海棘螈序列完全一致,该序列最精确反应了现有镇海棘螈与其他近缘物种的地理分化和亲缘关系。因此,与其他基因相比,CO I基因是镇海棘螈物种鉴定和分类研究的首选序列。(2)繁殖场选择:通过对水体、植被等生态因子比较发现,镇海棘螈繁殖场选择偏好植被郁闭度高、水位较浅、水面积较小、溶解氧较低的区域。同时,通过对镇海棘螈稳定繁殖水塘的调查,得知镇海棘螈繁殖栖息地优势植被,能够对栖息地植被改造以及制作人工栖息地具有重要的指导意义。(3)野外个体早期生长发育:2015-2018年对镇海棘螈产卵量进行野外观测,比较发现不同年份、不同繁殖场产卵量不同。2018年镇海棘螈产卵期自3月末持续至5月初;平均卵数72.40±33.57粒/窝(n=88)。卵孵化率为93.87±3.92%,孵化期共35-50天。胚胎孵化后幼螈入水率为27.45±16.13%。水生幼体体全长(X)与体重(Y)呈现曲线相关,Y=38.12X2-52.99X+23.11(R2=0.7562)。幼螈水生发育62-82天,完成变态发育后上岸率仅为16.44±11.80%,在早期发育历期种上岸过程死亡率最高。(4)人工培养胚胎发育和幼体生长曲线、食性分析:通过对镇海棘螈胚胎人工孵化、人工饲养,了解镇海棘螈胚胎发育、早期个体发育过程。并对镇海棘螈水生幼体食性进行统计分析。本研究共采用5种不同饲料对镇海棘螈幼体进行投喂。结果表明:(1)在5种单一饲料中以水丝蚓(Tubifex)为单一饲料对幼体进行饲养与其他饲料饲养具有明显差异(P<0.05),其饲养效果最为理想;(2)镇海棘螈采食偏好活饲料,熟鸡蛋黄不适合作为幼体饲料;(3)通过人工投喂饲料饲养的幼体相比野外个体能够具有更高的幼体体质;(4)混合饲料相较单一饲料具有更好的喂养效果。通过对早期个体发育阶段、幼体食性的探究有利于指导镇海棘螈的人工繁育苗种,从而达到野外放归、扩大野外种群分布和数的目的。