补体因子CD59缺乏对C57BL/6小鼠胆汁淤积性肝损伤的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:arlunfly
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目的:观察补体因子CD59缺乏在小鼠胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)模型中对胆汁淤积性肝损伤的作用。方法:(1)手术组使用异氟醚通过呼吸机吸入麻醉小鼠,剖腹术后,将胆总管双重结扎并断开,缝合腹腔;假手术组麻醉和剖腹术后10min直接关腹,不作胆管结扎和离断。手术后第3天处死小鼠。(2)小鼠血清肝功能生化指标测定:应用全自动生化仪检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)水平。(3)苏木素—伊红(Hematoxylin and eosin,HE)染色观察肝组织病理形态:对小鼠肝组织切片进行HE染色法观察肝组织病理形态和结构变化。(4)ELISA检测血清C3a和C5a水平:采用ELISA法测定小鼠血清补体C3a、C5a水平,酶标仪450nm处检测酶标板各孔的吸光度(A)值,根据标准曲线计算检测样本的浓度。(5)免疫组化检测肝组织中MAC表达:为了检测MAC沉积量,在石蜡包埋的组织切片上进行免疫组织化学染色。结果:(1)与野生型小鼠比较,在CD59缺乏的BDL小鼠中观察到血清ALT[(730.67±104.50)U/L比(311.33±52.47)U/L,t=8.784,P0.05]水平差异无统计学意义,表明CD59缺乏不影响体内C3和C5活化产物的产生。(4)在CD59缺乏的小鼠肝组织中观察到膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC)沉积量增加。结论:(1)小鼠发生胆汁淤积性肝炎期间,体内补体级联反应的激活。(2)补体因子CD59缺乏可加重小鼠胆汁淤积性肝损伤;(3)敲除补体因子CD59后,小鼠发生胆汁淤积性肝炎时肝组织内MAC表达上调;(4)敲除补体因子CD59后,小鼠胆汁淤积性肝损伤加重可能与MAC表达上调有关。
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