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目的:乌苏里藜芦总生物碱(Veratrum nigrum L. var.ussuriense Nakai alkaloids;VnA)是从辽宁省千山乌苏里藜芦根中提得的生物碱。经本研究小组近年来的实验研究已经证明VnA具有强大的抗血栓等作用。乌苏瑞宁(verussurinine, VSRN)是从VnA中分离得到的单体生物碱之一,本实验旨在对VSRN抗血栓作用及其对血小板聚集、血液流变学和凝血出血时间的影响进行研究,为阐明VnA的抗栓活性成分及其作为高效能新型抗栓药物的研发提供实验依据。方法和结果:1对实验性血栓形成的影响1.1对电刺激大鼠动脉血栓形成的影响按电刺激法诱发大鼠颈动脉血栓形成模型,观察VSRN对血管堵塞时间(OT)的影响。结果表明,与NS组相比,VSRN静脉注射1.25、2.5、5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1后,OT分别延长21.93%、26.23%、47.63%、28.01%和7.76%。阳性对照LAS静脉注射18000μg﹒ kg-1 OT延长57.01%。1.2对大鼠静脉血栓形成的影响按Rayers法,采用瘀血诱发大鼠下腔静脉血栓形成模型。观察VSRN对大鼠血栓形成率和血栓干重的影响。结果表明,与NS组相比,静脉注射VSRN1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1,VSRN各受试剂量组和阳性对照均可使血栓形成率下降,且血栓干重减少呈剂量依赖关系。2对血小板聚集的影响2.1对大鼠体内血小板聚集的影响按Born提出的比浊法测定血小板聚集率,观察静脉注射VSRN对大鼠体内血小板聚集的影响。结果表明,与NS组相比,VSRN2.50、5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1各组对大鼠体内血小板聚集抑制率分别为18.50%、28.60%、49.00%和61.30%,且剂量为10μg﹒kg-1的VSRN对血小板的抑制作用与18000μg﹒kg-1的LAS相当。2.2对大鼠体外血小板聚集的影响同样按Born提出的比浊法测定血小板聚集率,观察VSRN对大鼠体外血小板聚集的影响。结果表明,与NS组相比, VSRN终浓度6.25、12.50、25.00、50.0μg.L-1各组对大鼠血小板聚集抑制率分别为18.50%、26.60%、44.00%和57.80%。与NS组相比,阳性对照LAS18000μg﹒kg-1的血小板聚集抑制率为43.00%。3对家兔血液流变学的影响家兔分别iv VSRN2.50、5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1,药前和药后20min、1h和3h由心脏采血,肝素(终浓度25u/ ml)抗凝,分别测定高切全血比粘度和低切全血比粘度以及血浆比粘度。结果表明,用药后全血粘度、血浆粘度均有显著降低,且呈良好的量效关系,同时显示各剂量下,VSRN的降粘作用至少能维持3小时。4对小鼠全血凝血时间的影响采用毛细玻璃管法测定小鼠全血凝血时间(Whole blood clotting time ,CT),观察VSRN各剂量组对小鼠CT的影响,结果表明,与NS组相比,VSRN静脉注射5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1,小鼠CT分别为136.50±16.80s、193.00±16.40s和231.00±10.30s,其延长百分率分别为13.18%、38.60%和48.70%。5对小鼠尾出血时间的影响按鼠尾横切法测定小鼠尾出血时间(Bleeding Time,BT),观察VSRN各剂量组对小鼠BT的影响。结果表明,与NS组相比,VSRN静脉注射5.00、10.00、20.00μg﹒kg-1,小鼠BT分别为17.30±1.68、23.00±5.90和27.00±3.20,分别延长百分率20.81%、40.43%和49.25%。结论:VSRN静脉注射显示有强大的大鼠抗动脉血栓和抗静脉血栓形成作用。VSRN静脉注射可显著降低正常大鼠血小板聚集率,表明有抗血小板的作用。VSRN静脉注射可明显降低全血比粘度和血浆比粘度,表明VSRN能改善家兔的血液流变学。VSRN静脉注射可显著延长小鼠CT,表明有抗凝作用。VSRN静脉注射可致小鼠BT延长,提示VSRN抗凝同时可能伴有出血倾向。综上,VSRN很可能是乌苏里藜芦生物碱中抗血栓作用的一种活性成分,并展示其良好的研发前景。