酚类高分子的生物合成在染料合成、化妆品制造、医药行业、塑料工业生产等方面有重大的意义。黄漆酶催化有机物的合成具有很多的优点:底物范围广、工艺简单、反应条件温和、产物基本无毒害。在高分子聚合染料─一种非常有潜力的新型染料的合成方面,白腐菌Trametes sp.SQ01所产生的黄色漆酶可以在介体不存在的条件下,使二酚类物质发生聚合生色反应,且反应过程中并没有生成中间体而聚合生成呈现出不同颜色的高分子聚合物。然而,反应中存在两大问题:一,反应过程中黄漆酶的利用率低、产物合成效率低;二,反应存在黄漆酶产量低、获取周期长、产量不稳定等不足。在本论文中,我们通过单因素实验优化黄漆酶催化二酚类物质聚合生色反应的反应条件,找到黄漆酶对三种二酚类物质聚合生色反应的最适条件,并进行冗余分析、催化动力学研究,考察反应时间、酶浓度、pH、温度、转速、底物浓度各因素对反应的影响,掌握黄漆酶对不同二酚类物质生物氧化特性的差别,来解决问题一。结果表明,在考察的几种条件下,三种底物的最适反应条件均不同,邻苯二酚最适条件为:反应时间为80 min,酶浓度为0.8 U/ml,pH为5,温度为50℃,转速为300 r/min,底物浓度为2 mM;间苯二酚最适条件为:反应时间80 min,酶浓度1.0U/ml,pH 5,温度50℃,转速300 r/min,底物浓度为5 mM;对苯二酚最适条件为:反应时间为80 min,酶浓度为1.0 U/ml,pH为4,温度为50℃,转速为300 r/min,底物浓度为5 mM;pH、酶浓度、底物浓度对反应的影响较大;冗余分析证实,pH对二酚类物质聚合的影响最大,酶浓度、温度、底物浓度次之;动力学分析表明,邻苯二酚是黄漆酶催化的最适底物。为了解决白腐菌SQ01产黄漆酶的不足。我们采用黄漆酶在里氏木霉中表达来解决这一问题。首先我们通过黄漆酶蛋白的纯化、肽谱测序、Trametes sp.SQ01转录组测序、构建Trametes sp.SQ01本地蛋白质数据库、blast比对、生物信息学分析获得黄漆酶的基因序列。结果表明:白腐菌Trametes sp.SQ01黄漆酶的基因序列为c13470_g1。之后我们通过构建重组表达载体pSKPssT,构建重组表达载体pSKPssLT,里氏木霉Tu6菌株原生质体制备、转化、筛选,构建高效表达黄漆酶的工程菌。结果表明:我们成功构建了表达黄漆酶的工程菌,但重组蛋白很可能没有顺利表达并分泌到培养基中,或者重组蛋白已降解,导致工程菌没有分泌具有活性的漆酶。