寡糖及其组合对小鼠肠道微生物及免疫调节作用的研究

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非消化性寡糖是一种能通过选择性的刺激肠道益生菌的生长与活性从而改善寄主健康的食品成分。为了探究非消化性寡糖及其组合对肠道内益生菌的增殖效果,本研究进行了非消化性寡糖对益生菌的体外增殖试验,并进行小鼠动物实验,采用高通量测序技术对小鼠肠道菌群进行分析以及对小鼠进行免疫指标的测定,结果如下:1.筛选出了体外对益生菌的增殖效果较好的非消化性寡糖及不同组合。在脱脂乳培养基中添加单一寡糖:低聚半乳糖、低聚果糖、低聚木糖三种,三种寡糖进行不同组合:低聚半乳糖与低聚果糖、低聚半乳糖与低聚木糖、低聚果糖与低聚木糖及每种组合下的不同配比:1:1、1:1.5、1.5:1、1:2、2:1。然后接种发酵,对发酵乳中乳酸含量以及活菌数目的测定。非消化性寡糖及不同组合最佳添加量为:低聚半乳糖0.5%、低聚木糖与低聚果糖1%;低聚木糖和低聚半乳糖(1:1.5)0.5%、低聚半乳糖和低聚果糖(2:1)0.5%、低聚木糖和低聚果糖(2:1)0.5%,其中低聚木糖和低聚半乳糖(1:1.5)0.5%增殖效果最好。2.对低聚果糖、低聚木糖和低聚半乳糖三种非消化寡糖及其组合对小鼠肠道菌群的影响进行了研究,将小鼠随机分为7组:空白对照组、低聚木糖组、低聚半乳糖组、低聚半乳糖组、低聚木糖与低聚半乳糖(1:1.5)复合组、低聚木糖与低聚果糖(2:1)复合组、低聚半乳糖与低聚果糖(2:1)复合组,连续灌胃20天,收集小鼠新鲜粪便,用高通量测序技术分析其中微生物群落组成和结构的变化。结果表明:与对照组相比,试验组小鼠肠道有益菌与致病菌比例差异显著,复合寡糖试验组小鼠肠道菌群物种多样性和丰富度最高,单一寡糖灌胃组次之;在属水平上,与对照组相比,试验组均显著(P<0.05)提高有益菌的物种丰度,其中低聚木糖与低聚半乳糖(1:1.5)复合组、低聚木糖与低聚果糖(2:1)复合组显著(P<0.05)提高乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度。3.对低聚果糖、低聚木糖和低聚半乳糖三种非消化寡糖及其组合对小鼠的免疫调节作用进行了研究,通过测定小鼠免疫器官指数、巨噬细胞吞噬能力、血清溶血素水平、DTH迟发型变态反应程度、脾淋巴细胞增殖水平等指标,评价不同非消化寡糖及其组合对小鼠的免疫调节作用。非消化寡糖能够提高小鼠的非特异性免疫能力,其中低聚木糖与低聚半乳糖(1:1.5)组合组免疫效果极显著(P<0.01)高于对照组。
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